目的：体外培养兔视网膜Müller细胞，模拟糖尿病患者体内血糖急性波动状态，观察葡萄糖的稳定性对兔视网膜Müller细胞生长活性及iNOS表达的影响，并探讨血糖波动在糖尿病视网膜病变中的作用及其可能机制，为糖尿病视网膜病变的治疗及预防提供理论依据。方法：使用酶消化法培养兔视网膜Müller细胞；通过电镜、荧光免疫技术进行细胞鉴定和纯度评估。取生长状态良好的第二代细胞用于实验，实验分为5组：正常对照组（glucose5.5mmol/L）；高浓度葡萄糖持续组（glucose30mmol/L）；葡萄糖浓度波动组（glucose5.5/30mmol/L，日间高糖3h，低糖2h，波动3次，高糖过夜）；渗透压对照组1（（glucose5.5mmol/L+甘露醇24.5mmol/L）持续培养）；渗透压对照组2（日间（glucose5.5mmol/L+甘露醇24.5mmol/L）3h，低糖2h，波动3次，（glucose5.5mmol/L+甘露醇24.5mmol/L）过夜）。用MTT法测定Müller细胞生长活性的变化。采用荧光免疫技术对Müller细胞胞内的诱导型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase，iNOS）进行荧光标记，通过图像分析软件测定平均光密度值，观察Müller细胞内iNOS的表达变化。结果：（一）使用酶消化法培养兔视网膜Müller细胞，培养2-3d，培养瓶底即可见有部分贴壁细胞，细胞透明，呈圆形或略呈梭形，可见部分突起；约16d，细胞铺满整个瓶底，形态较均一，呈不规则形，可见细胞突起；电镜下可见Müller细胞胞浆内含有丰富的8~10nm微丝及各种细胞器；荧光免疫标记见兔视网膜Müller细胞胞内视黄醛结合蛋白（cellular retinaldehyde bindingprotein,CRALBP）、谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase,GS）呈绿色和红色荧光标记，二者阳性率均95%以上；（二）葡萄糖浓度波动组（5.5/30mmol/L）与高浓度葡萄糖持续组（30mmol/L）作用于兔视网膜Müller细胞3d后，与正常对照组及渗透压对照组1、2相比较，葡萄糖浓度波动组与高浓度葡萄糖持续组细胞生长活性下降（p<0.01），iNOS表达升高（p<0.01）；且葡萄糖浓度波动组与高浓度葡萄糖持续组比较，葡萄糖浓度波动组细胞生长活性显著下降（p<0.01），iNOS表达升高（p<0.05），均有统计学意义；渗透压对照组1、2与正常对照组相比，细胞生长活性及iNOS表达差异无统计学意义（p＞0.05）。结论：（一）酶消化法培养兔视网膜Müller细胞较组织块法能明显缩短培养时间，得到的细胞数量大、纯度高，能更好的满足实验进程的需要；（二）高浓度葡萄糖可能通过增强iNOS的表达损伤Müller细胞的功能，而这种损伤与葡萄糖浓度有关，与渗透压无关；且葡萄糖浓度波动比持续高浓度葡萄糖更具细胞毒性，在糖尿病视网膜病变的发生发展中发挥着重要作用。