研究背景：　　内分泌干扰物滴滴涕（DDT）是历史上使用时间最长的杀虫剂之一。目前体外研究实验表明，DDT具有激动雌激素受体的作用，且动物实验证实长期暴露于低剂量的DDT代谢物DDE可以加速乳腺癌的发生，但具体的内在机制尚未被阐明。事实上，现有研究表明胎儿期暴露于低剂量环境毒物的小鼠将出现一系列异常改变，而流行病学的调查显示4岁之前暴露在DDT中的女性会比14岁之前暴露的女性患癌风险增加5倍。最新研究显示，乳腺干细胞（mammary stem cells，MaSCs）可能与乳腺癌的发生、进展有关，且极有可能是细胞癌变的原发靶细胞。目前DDT是如何导致乳腺癌风险的发生机制尚不明确，且动物实验研究基本空白。根据以上证据，本研究提出胎儿期DDT暴露所导致的小鼠成年乳腺的系列异常变化可能是经由乳腺干细胞介导的科学假说。为了更好地验证这一假说，本研究选择了孕期DDT的暴露窗口，研究DDT对于母代和子代小鼠乳腺的影响。　　研究方法：　　本研究的第一部分研究孕期暴露DDT对于经产小鼠乳腺干细胞的影响。即把3-4月龄的FVB-GFP在怀孕第11天灌胃低剂量（2，20，200μg/kg/day）DDT至第18天，待子代小鼠3周龄时断奶，等待乳腺退化1个月之后，收集乳腺。生下的子一代小鼠，在同月龄时怀孕，不经任何处理，待子二代小鼠3周龄时断奶，等待乳腺退化1个月之后，收集乳腺。根据乳腺形态学、组织学、乳腺干细胞体外定性和定量检测方法（SFD）和体内移植乳腺再生（IVT）技术来观察孕期暴露DDT的影响。本研究的第二部分研究母代暴露低剂量DDT对于子代成年处女小鼠的乳腺干细胞的影响。即子一代、子二代、子三代处女小鼠在3-4月龄时收获乳腺。根据乳腺形态、组织学变化和乳腺干细胞体外定性和定量检测方法来观察DDT对乳腺干细胞产生的世代效应。本论文的第三部分，收集子代小鼠乳腺形成的3D实体结构，进行免疫组化染色，观察低剂量DDT暴露对于小鼠乳腺干细胞基因表达的影响。同时，为了确定DDT暴露的跨代遗传效应是经雌性还是雄性的系谱传播，将子一代对照组小鼠与各剂量组杂交，根据乳腺形态和乳腺干细胞体外定性和定量检测方法来观察。之后，测定Dnmt1，Dnmt3a和Dnmt3b的mRNA表达，以推测DNA甲基化修饰可能是DDT暴露所发生的的跨代效应产生的机制之一。　　研究结果：　　本研究的第一部分结果显示孕期DDT暴露可导致母体乳腺组织中代表炎症反应和脂肪凋亡的指标“冠状结构”的明显增多，乳腺细胞经流式分析发现，干细胞频率的增加，但是乳腺干细胞移植再生的能力降低。子一代的乳腺也有相同的变化趋势。之后对乳腺组织Cox-2的免疫组化染色发现，处理组的表达升高。第二部分研究结果显示，孕期低剂量DDT暴露具有遗传效应，会促使子一代、子二代、子三代小鼠的体重增高，乳腺导管分支增加，基底干细胞的频率升高。第三部分的研究显示，围产期暴露会提高子代乳腺干细胞形成的3D实体结构的Ki67的表达升高，增加炎症反应指标Cox-2的表达，原癌基因c-Fos的表达升高。而DDT的跨代作用可能通过父系和母系共同影响，且处理组Dnmt3a的mRNA表达增高。　　研究结论：　　本研究首次将DDT诱导的乳腺形态变异和肿瘤易感性增加与乳腺干细胞联系起来。研究结果表明，在乳腺发育的早期阶段乳腺干细胞是DDT的主要作用靶细胞。本研究为DDT影响乳腺癌发生和发展的潜在机制提供了依据。