灵芝生理生化研究

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本文主要研究了灵芝发酵产灵芝多糖、纤维素酶及臭氧对灵芝菌丝的杀灭作用三个方面内容。 1.通过纸层析的方法发现其包含有三种单糖组分:葡萄糖、果糖、甘露糖,气相色谱分析也证明了这一点,特别是用SephadexG-200凝胶柱层析纯化了灵芝胞内、胞外多糖,并经红外光谱对其进行了分析。同时对灵芝菌丝体氨基酸组成进行了分析,灵芝菌丝体中共含有16种氨基酸,其中含较多脂肪族氨基酸,不含色氨酸、胱氨酸。 2.通过3,5-二硝基水杨酸比色法测定了CMC酶活。经硫酸铵盐析并透析脱盐后通过FPLC对灵芝所产纤维素酶进行了纯化,有六个峰,用红外光谱、紫外光谱等手段进一步分析了主要峰的性质。对灵芝纤维素酶的氨基酸组成也进行了分析,灵芝纤维素酶共含13种氨基酸,其中脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸较多。同时研究了pH和温度对灵芝纤维素酶稳定性的影响,灵芝纤维素酶在55℃时酶活最高,对温度的稳定性较强,灵芝纤维素酶在pH2.2和4.2时酶活为两个极大值。 3.以灵芝菌丝作为研究对象,测定了负离子发生器放电时间、臭氧浓度、灵芝菌丝致死率之间的曲线关系。结果表明,随着放电时间增大,臭氧浓度变大,致死率明显上升,到一定时间后又趋缓,在生物显微镜下认真观察了正常菌丝和被破坏菌丝形态学上的差别,在透射电子显微镜下观察了菌丝的外观结构,用激光共聚焦扫描显微镜观察了灵芝菌丝破坏前后及吖啶橙染色与不染色的形态结构,经低真空扫描电镜、原子力显微镜观察了臭氧处理前后灵芝菌丝细胞的变化情况,探索了臭氧对真核生物灵芝菌丝细胞破坏的机制。   
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