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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是上个世纪80年代末出现的一种严重危害世界养猪业的病毒性传染病,主要引起母猪的繁殖障碍和其它各年龄猪的呼吸道症状及仔猪的高死亡率。猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)基因组为单股正链RNA,可编码7种结构蛋白,其中由ORF7基因编码的核衣壳蛋白(N)在病毒粒子中的含量最高,保守性强。N蛋白上含有核定位序列及与RNA结合的结构域,与病毒的复制过程密切相关。筛选与PRRSV N蛋白相互作用的宿主蛋白有利于进一步阐明病毒的感染机制以及宿主抗病毒的机制。鉴于此,本研究通过酵母双杂交技术从猪脑cDNA文库中筛选了与PRRSV N蛋白相互作用的宿主蛋白,并进行了验证,主要研究内容如下：1.与PPRSV WuH3株N蛋白相互作用的宿主蛋白的筛选扩增了PPRSV WuH3株ORF7基因,插入到载体pGBKT7中构建了重组质粒pGBKT7-N。以pGBKT7-N为钓饵通过酵母双杂交技术从猪脑cDNA文库中筛选与PRRSV N蛋白相互作用的宿主蛋白,获得了81个阳性克隆。通过测序分析,获得了5个可能与PRRSV N蛋白相互作用的宿主蛋白。经初步筛选后选择了两个兴趣蛋白,即：核内小分子核糖核蛋白多肽G(SNRPG)和半乳糖苷凝集素(LGALS1),进行后续试验。2.对筛选到的宿主蛋白与PRRSV N蛋白之间相互作用的验证利用酵母回返试验和GST-pull down实验分别在酵母体内和体外证明了筛选到的两个宿主蛋白SNRPG和LGALS1能与PRRSV N蛋白发生作用。荧光共定位试验进一步证实PRRSV N蛋白能分别与SNRPG和LGALS1在细胞胞浆存在共定位。3.宿主蛋白SNRPG对PRRSV增殖的影响运用RNA干扰分子,对细胞中SNRPG进行干扰后接种PRRSV,再通过绝对荧光定量PCR和TCID50试验分别从mRNA和蛋白水平检测干扰SNRPG后PRRSV的增殖,结果表明：干扰了SNRPG之后对PRRSV的增殖并无影响。