水飞蓟(silybum marzianum)是菊科水飞蓟属,一或二年生,草本植物。水飞蓟喜凉爽干燥气候,适应性强,对土壤环境,水分要求不严,盐碱地、荒滩、地头均可种植。原产于欧洲,70年代初期引入我国,作为保肝药用植物推广种植,其药效成分为水飞蓟中黄酮类物质。水飞蓟中黄酮类物质与其复合物,生物活性较高。其对肝硬化、脂肪肝、酒精性肝炎和代谢中毒性肝炎具有较好疗效。对水飞蓟中黄酮类物质提取效果的评价,目前多采用国家标准中的2,4-二硝基苯肼法。但此法操作过于繁琐,经多次实验证实重现性较差。本实验中以水飞蓟宾为对照品,制作标准曲线,利用紫外分光光度法测定提取物中总黄酮的含量。为了更好更全面地评价了不同溶剂、不同提取方式的提取效果,本实验还采用了高效液相色谱法对水飞蓟中活性成分水飞蓟宾进行含量测定。最终结果表明这两种方法简便,准确、重现性好,可用于水飞蓟提取物中总黄酮及水飞蓟宾的含量测定。本实验中水飞蓟中黄酮类物质的提取按实验室研究阶段(索氏提取法、快速溶剂萃取法、碱提酸沉法)和中试阶段(罐式循环提取法)两个阶段四种方法进行单因素考察,之后正交筛选,最终确立各种方法条件下的较优提取工艺。以此希望能找到一条提取率较高的水飞蓟中黄酮类物质的提取工艺,为后续研究提供改进依据。水飞蓟宾是水飞蓟中黄酮类物质各成分活性及含量最高的组份,是水飞蓟中黄酮类物质含量测定的标准物质,所以本文以水飞蓟中黄酮类物质为原料,对水飞蓟宾的精制与纯化方法进行研究。首先用AB-8大孔吸附树脂进行柱色谱分离,依次分别用30%乙醇溶液、60%乙醇溶液和95%乙醇溶液洗脱,合并各组分后对其进行硅胶柱色谱分离与ODS柱色谱及高效液相色谱分离,共分离得到2个单体化合物,经理化分析及对它们的各种波谱数据的解析,确(鉴)定了2个单体化合物的化学结构。应用传统重结晶法、柱层析法对精制水飞蓟宾的方法进行比较,考虑到产率、安全、价格和实验条件等因素,最终确定精制水飞蓟宾的较优方法。有机溶剂重结品水飞蓟宾的较佳条件为取1O.Og水飞蓟提取物加乙醇加热回流,静置,抽滤,得到水飞蓟宾粗品约1.7g左右。取1.0水飞蓟宾粗品,加乙醇加热回流,静置,抽滤得水飞蓟宾0.46g。水飞蓟宾粗品的产率为17.2%,飞蓟宾的产率为46%(按水飞蓟宾粗品计)。