【摘 要】
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用生物材料引导牙周组织再生是修复缺损牙周组织的潜在有效途径。用于引导牙周组织再生的支架除了要给牙槽骨种子细胞提供适宜的生长环境外,还要阻止生长速度较快的牙龈上皮细胞长入缺损区,给种子细胞提供足够的时间和空间,保证缺损组织的正常再生。本课题的目的是构建未来有可能用于牙周组织引导再生的丝素(SF)/聚己内酯(PCL)/纳米羟基磷灰石(nHA)双层复合材料。该材料由上、下两层材料组装而成,其下层是采用冷
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用生物材料引导牙周组织再生是修复缺损牙周组织的潜在有效途径。用于引导牙周组织再生的支架除了要给牙槽骨种子细胞提供适宜的生长环境外,还要阻止生长速度较快的牙龈上皮细胞长入缺损区,给种子细胞提供足够的时间和空间,保证缺损组织的正常再生。本课题的目的是构建未来有可能用于牙周组织引导再生的丝素(SF)/聚己内酯(PCL)/纳米羟基磷灰石(nHA)双层复合材料。该材料由上、下两层材料组装而成,其下层是采用冷冻干燥法制备的SF/nHA复合多孔材料,充分利用nHA的骨传导性、骨诱导性和丝素蛋白优良的细胞粘附性以及材料成型性,作为引导细胞粘附、增殖、血管生成和骨组织再生的支架;其上层是用SF/PCL共混纤维网增强的致密丝素膜,充分利用SF的良好生物相容性,并利用PCL良好的力学性能弥补SF膜的不足,作为防止牙龈上皮和周围结缔组织长入多孔支架的隔离层。首先,以六氟异丙醇为SF和PCL的共溶剂,采用高压静电纺丝技术纺制了SF/PCL共混纤维网,对纤维网的拉伸性能进行测试和分析。结果表明,SF/PCL纤维网干态及湿态拉伸断裂强度、断裂伸长率都显著大于SF纤维网,说明通过PCL与SF共混,能够显著提高SF纤维网的韧性;在此基础上,用SF/PCL纤维网作为丝素致密膜的增强材料,流延法制备SF/PCL复合膜,研究纤维网对丝素膜的增强作用效果和机理。电子显微镜观察结果显示,膜内纤维与基体丝素之间结合紧密,拉伸性能测试结果表明,复合膜的拉伸断裂强度和断裂伸长率,尤其是断裂伸长率,均显著高于纯丝素膜,SF/PCL纤维能够通过纤维桥联作用达到对丝素膜显著增强的效果。其次,采用冷冻干燥法制备了 SF/nHA质量比不同的复合多孔材料。电子显微镜观察结果显示,随着多孔材料内羟基磷灰石所占比例的增大,材料内孔之间的连通性提高。孔径测试结果表明,当多孔材料内nHA所占比例小于30%时,其孔径和孔隙率随着羟基磷灰石所占比例的增大而增大。在SF/nHA质量比为70/30时,孔径和孔隙率达到最大,平均孔径为213.5μm,孔隙率为81.2%。湿态压缩性能测试结果表明,当多孔材料内nHA所占比例小于30%时,压缩强度和压缩模量随着羟基磷灰石所占比例的增大而增大。在SF/nHA质量比为70/30时,压缩强度提高到7.16 kPa,压缩模量为12.8 kPa,与纯丝素多孔材料相比,压缩强度和模量显著提高。最后,用丝素蛋白溶液作为粘合剂,将SF/PCL复合膜与SF/nHA复合多孔材料组装成SF/PCL/nHA双层复合支架,对支架的湿态拉伸力学性能以及细胞相容性进行了初步测试。实验结果表明,复合膜对支架起到力学支撑的作用,骨髓间充质干细胞在双层复合支架上的增殖速度显著快于对照组。本文先制备了 SF/PCL复合膜和SF/nHA复合多孔材料,然后将这两种材料组装成了 SF/PCL/nHA双层复合支架,为后续将该复合支架用作牙周组织再生提供了材料制备技术基础。
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