砖红绒盖牛肝菌子实体、菌丝和原基的显微及超微结构观察

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砖红绒盖牛肝菌(Xerocomus spadiceus)隶属于担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲(Agaricomycetes)、牛肝菌目(Boletales)、牛肝菌科(Boletaaceae)、绒盖牛肝菌属(Xerocomus)。牛肝菌为一类世界范围广布真菌,其子实体味道鲜美,营养丰富,并具有极高的药用价值,因此深受人们喜爱。但牛肝菌季节性强,产量低,资源有限,且近年来随着人们需求的不断增加,加之过度的采摘及生态环境的日益破坏等,仅靠野外资源难以实现可持续性开发利用。牛肝菌大多属于菌根菌,目前除少数几种腐生种外,绝大部分尚不能人工培养,其在纯培养条件下仅停留于菌丝体阶段,且菌丝生长缓慢,难以形成原基,难以完成后期发育,难以形成子实体,完成整个生活史。现阶段牛肝菌的研究主要集中于分类,营养成分分析,菌丝诱导及培养基优化,菌丝发酵提取活性成分等方面,基础研究仍然薄弱。由于生境复杂,其自然条件下的生活史及生长发育机制尚不清楚。砖红绒盖牛肝菌是云南牛肝菌的典型代表,且经过近年的不断摸索,已在实验条件下诱导出原基。因此本文以砖红绒盖牛肝菌为实验材料,通过荧光染色、扫描电镜和透射电镜,研究野外成熟子实体担孢子的形成过程,研究子实体、菌丝体、原基三个主要生长发育时期的显微及超微结构,旨在弄清楚其生活史。这为丰富大型菌根真菌的细胞学理论,为今后牛肝菌属真菌及其他珍稀野生食用菌的人工栽培提供了重要依据。主要研究结果如下:1.担孢子由子实层栅栏状排列的担子产生,每个担子产生四个担孢子,担孢子大多数为单核;成熟担孢子呈长椭圆形,表面光滑,大小为8~10 μmX3 μm。2.孢子萌发的适宜培养基为(1L计):马铃薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨2g、酵母 2g、琼脂 9g、MgSO40.5g、KH2PO40.46g、K2HPO4lg;孢子接种前需进行45 ℃热刺激;其培养适宜温度为35℃;萌发时,初生菌丝大多数由孢子长轴端萌发,少数由孢子侧面萌发;初生菌丝为单核。3.子实体菌盖菌丝直径约为3.5 μm,菌丝表面光滑,细胞呈无规则紧密排列,无锁状联合,菌丝细胞大多数为双核,细胞中含线粒体、核糖体、液泡等细胞器,含分生孢子;纯培养菌丝直径约为1.7 μm,菌丝表面光滑,为双核细胞无锁状联合,细胞中也能观察到上述细胞器;原基菌丝直径约为2.5 μm,菌丝表面光滑,无锁状联合,菌丝细胞为双核,仍然有上述细胞器。可见三个时期菌丝均为双核细胞。菌根真菌在纯培养条件下尚未能诱导出原基,因此不同发育时期的细胞学研究较少,本文对子实体、菌丝、原基三个不同发育阶段的细胞形态及细胞核数目进行了对比研究,同时探索担孢子培养的适宜条件。这是本文的主要创新点。
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