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为进一步探讨过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对芽孢菌、球虫卵囊和细小病毒的杀毒效果及其质量控制方法,本研究将通过观察过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对枯草芽孢杆菌黑色变种、柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和猪细小病毒的杀毒效果,并采用高效液相色谱法测定该消毒剂中有效成分含量,对所采用方法的专属性、重复性、准确度、线性相关性以及检测限进行验证,确定过氧乙酸戊二醛复方消毒剂的消毒确切效果及方法的可靠性。试验结果表明：(1)采用悬液定性杀灭和定量杀灭试验方法,对过氧乙酸戊二醛复方消毒剂杀灭枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢进行试验。试验结果显示：稀释2-64倍,作用5min或稀释256倍,作用30min,可有效杀灭枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢；稀释256倍作用45min或稀释64倍作用7.5min,杀灭率达到100%。表明过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢的最低杀灭浓度为0.39%,最短杀灭时间为5min。(2)采用动物试验(SPF雏鸡)方法,对过氧乙酸戊二醛复方消毒剂杀灭柔嫩艾美耳球虫卵囊进行试验。试验结果显示：稀释8～2048倍,作用5min～60min,未成熟卵囊孢子化率无明显下降(P>0.05)；随着该消毒剂浓度增高和作用时间延长,孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊引起的鸡盲肠病变记分、卵囊产量、增重减少率等有所下降,但抗球虫指数(ACI值)均小于160,不能有效杀灭柔嫩艾美耳球虫卵囊；(3)采用体外细胞感染试验,对过氧乙酸戊二醛复方消毒剂杀灭猪细小病毒进行试验。试验结果显示：过氧乙酸戊二醛复方消毒剂稀释8～128倍,作用5min或稀释2048倍,作用30min,可100%杀灭猪细小病毒。表明过氧乙酸戊二醛复方消毒剂对猪细小病毒的最低杀灭浓度为0.049%,最短杀灭时间为5min。(4)采用高效液相色谱法与化学滴定法,测得过氧乙酸戊二醛复方消毒剂中过氧乙酸、过氧化氢、戊二醛含量差异均不显著(P>0.05)；高效液相色谱法测定过氧乙酸戊二醛复方消毒剂中过氧乙酸、过氧化氢和戊二醛色谱峰的分离度分别为：3.00%、3.12%和2.50%,重复测定相同浓度该消毒剂各成分色谱峰面积相对标准差(RSD)均小于2.0%，进行加样回收试验,加标回收率在98.95%～100.39%之间,RSD也小于2.0%,且过氧乙酸戊二醛复方消毒剂A液和B液浓度分别在0.03%～1.00%范围内和0.11%-0.20%范围内与各色谱峰面积呈良好的线性关系,过氧乙酸、过氧化氢和戊二醛的检测限分别为：3.4ng、2.4ng和1.0μg。表明,以高效液相色谱法测定该消毒剂中有效成分含量的分离度大、专属性高、重现性好、回收率高、适用范围广、可测定微量成分含量。(5)采用54℃加速保存试验法,对加速保存14d前后过氧乙酸戊二醛复方消毒剂中有效成分含量的下降率进行测定。试验结果显示：过氧乙酸戊二醛复方消毒剂在54℃避光保存14d后,过氧乙酸、过氧化氢和戊二醛含量下降率均低于10%。表明,过氧乙酸戊二醛复方消毒剂在室温避光下可保存1年。