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卵巢癌为女性生殖系统三大常见恶性肿瘤之一,死亡率最高,病因及发病机制至今尚不明确,因起病隐匿、缺乏早期诊断指标,多数确诊时已属晚期,总体5年生存率仍未超过45%。卵巢上皮性癌占卵巢癌的85%～90%,研究卵巢上皮性癌发生发展的分子机制,寻找新的生物标记物和治疗靶点,改善预后仍是目前卵巢癌研究的热点。死亡相关蛋白激酶(DAPK)是作为抑癌基因,能够正向调节凋亡,在多种人类肿瘤中由于启动子甲基化而表达缺失。国外研究报道DAPK启动子在卵巢上皮性癌中的甲基化率0～67%不等,存在分歧,仍需进一步研究。最新研究表明自噬是机体的重要抑癌机制,自噬作用的抑制可能参与了肿瘤的发生发展。DAPK. ARHI均为自噬相关抑癌基因,研究DAPK. ARHI在卵巢上皮性癌中的表达情况及相关性分析有助于了解自噬在卵巢上皮性癌发生发展中的作用。本研究通过对不同卵巢组织中DAPK基因启动子甲基化、DAPK蛋白表达、ARHI蛋白表达的检测,探讨DAPK. ARHI在卵巢癌发生发展中的作用,以期为卵巢癌的诊治寻找新的方向。目的研究卵巢上皮性癌中DAPK基因启动子甲基化、DAPK蛋白表达、ARHI蛋白表达在卵巢上皮性癌发生发展过程中的作用及意义；分析卵巢上皮性癌中DAPK启动子甲基化与其蛋白表达的关系及意义；分析卵巢上皮性癌中DAPK蛋白表达与ARHI蛋白表达的关系及意义。材料和方法1.研究对象：收集2009年1月至2012年3月郑州大学第三附属医院病理科石蜡包埋组织135例,经病理证实为卵巢上皮性癌组织(恶性组)55例,卵巢交界性上皮肿瘤(交界组)25例,卵巢良性上皮性肿瘤(良性组)30例,正常卵巢上皮组织(正常组)25例。正常卵巢组织来源于因良性子宫疾病行子宫加单/双附件切除术的患者。卵巢上皮性癌患者年龄23-78岁,中位年龄为53岁,其中浆液性囊腺癌35例,黏液性囊腺癌12例,子宫内膜样癌8例,术前均未行放疗和化疗。2.研究方法：应用甲基化特异性PCR (MSP)检测上述135例卵巢组织中DAPK基因启动子的甲基化情况。应用免疫组织化学SP法检测上述135例卵巢组织中DAPK蛋白、ARHI蛋白的表达情况。3.统计学方法：应用SPSS17.0统计软件进行分析,甲基化和免疫组化结果分析应用卡方检验,检验水准a=0.05,组间两两比较时用四格表卡方检验,检验水准α’=α/比较次数=0.0083。两定性资料的相关性分析应用配对资料的关联性分析,检验水准a=0.05,关联程度用Pearson列联系数(rp)表示。基因甲基化和两种蛋白表达与临床病理特征的关系用卡方检验,检验水准a=0.05。结果1. DAPK启动子在正常组、良性组、交界组、恶性组的甲基化率分别为0(0/25)、6.7%(2/30)、16.0%(4/25)、47.3%(26/55),恶性组的甲基化率高于其他三组,差异有统计学意义(P<0.0083)。2. DAPK蛋白在正常组、良性组、交界组、恶性组的阳性表达率分别为96.0%(24/25)、90.0%(27/30)、48.0%(12/25)、30.9%(17/55),恶性组、交界组的阳性表达率均低于正常组和良性组,差异有统计学意义(P<0.0083)。3. ARHI蛋白在正常组、良性组、交界组、恶性组的阳性表达率分别为92.0%(23/25)、86.6%(26/30)、44.0%(11/25)、36.4%(20/55),恶性组、交界组的阳性表达率均低于正常组和良性组,差异有统计学意义(P<0.0083)。4.卵巢上皮性癌中,DAPK启动子甲基化和DAPK蛋白表达呈负相关(P<0.001,rp=0.485),DAPK蛋白表达和ARHI蛋白表达呈正相关(P<0.001,rp=0.430)。5.卵巢上皮性癌中,DAPK启动子甲基化和DAPK蛋白表达均与淋巴结转移有关(P<0.05)。与FIGO分期、组织分化、病理类型无关(P>0.05)。ARHI蛋白表达与FIGO分期、组织分化、组织学类型、淋巴转移均无关(P>0.05)。结论1. DAPK启动子在卵巢上皮性癌中存在中等程度甲基化现象,DAPK启动子甲基化导致基因沉默、失活,引起蛋白表达下调或缺失,并参与了卵巢上皮性癌的发生发展。2.自噬相关抑癌基因DAPK, ARHI在卵巢上皮性癌中均表达下调或缺失,二者可能协同作用导致自噬抑制并参与了卵巢癌的发生发展。