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背景:非病毒载体转染靶细胞能否在体内持续有效地表达细胞因子是目前生物科学领域一个热门和关键的问题目的:研究新型非病毒载体K16GRGDSPC转染骨髓基质干细胞能否在体内持续表达促进BMP活性多肽的异位成骨能力方法:通过新型非病毒载体(K)16GRGDSPC将TGF-β1真核表达载体pcDNA3-TGFβ1导入BMSCs,并用含G418的培养基筛选,得到阳性克隆并扩大培养,取部分细胞采取SABC法进行检测。将稳定转基因细胞与胶原海绵复合,同时加入BMP2活性肽P24,构建转基因细胞/胶原海绵/P24复合体。将该复合体植入大鼠竖脊肌浅层肌袋两侧,实验组在右侧,对照组左侧,共24只,分别于3周、5周、8周时各取8只对植入局部行CT成像,采用SIENET MagicView 300软件计算植入局部CT最高值,行ALP活性测定和HE组织学染色,观察复合体异位成骨的能力。以转染空载体pcDNA3组作为对照。结果SABC法检测实验组TGF-β1染色为阳性。3、5、8周时CT成像两组均可见骨组织形成,且呈时间相关性,实验组CT最高值分别为254±20、331±34、477±37,均明显高于同期对照组的CT值(分别为237±17、298±31、433±45)(P<0.05),碱性磷酸酶(ALP)活性测定实验组(57.78±0.64、65.7±0.59、71.83±0.67),亦高于对照组(55.46±0.55、63.27±0.53、70.32±0.63),HE染色可见实验组编织骨的数量明显多于对照组。结论(K)16GRGDSPC能成功介导TGF-β1转染BMSCs并持续在体内表达;TGF-β1基因转染可增强BMP2活性肽P24的体内异位成骨能力。