【摘 要】
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目的:从数据库中筛选出在肺癌组织中高表达的基因ENC1（外胚层-神经皮层1）,并研究ENC1对肺癌细胞A549和H1299生物功能的影响。方法:选取28例肺癌病人组织,检测癌组织与癌旁组织中ENC1的表达量,并评估了其与临床病理特征的关系。采用q PCR（实时定量聚合酶链反应）和Western（蛋白质印迹）印迹技术,检测ENC1在一个正常肺细胞系（16HBE）和两个肺癌细胞系（A549和H1299
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目的:从数据库中筛选出在肺癌组织中高表达的基因ENC1（外胚层-神经皮层1）,并研究ENC1对肺癌细胞A549和H1299生物功能的影响。方法:选取28例肺癌病人组织,检测癌组织与癌旁组织中ENC1的表达量,并评估了其与临床病理特征的关系。采用q PCR（实时定量聚合酶链反应）和Western（蛋白质印迹）印迹技术,检测ENC1在一个正常肺细胞系（16HBE）和两个肺癌细胞系（A549和H1299）中的表达。接着用si RNA靶向下调ENC1在肺癌细胞株A549和H1299中的表达,利用实时荧光定量PCR和WB检测干扰后ENC1基因的沉默效果,评价si RNA设计的合理性及RNA干扰抑制ENC1表达的有效性。干扰ENC1后,cck8和EDU试剂检测细胞增殖,transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。用质粒上调ENC1在肺癌细胞株A549和H1299中的表达,再做相关功能试验双向验证ENC1对肺癌的影响。并进行Western印迹检测相关蛋白的表达。在裸鼠中建立皮下异种移植肿瘤模型,研究ENC1表达对肺癌细胞体内肿瘤生长的影响。结果:肺癌组织和细胞中ENC1表达量明显高于癌旁组织（P<0.01）。ENC1-si RNA转染组细胞增殖能力,迁移及侵袭能力相对于对照组都降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。进一步的实验表明,敲低ENC1的表达会显著下调MMP2、MMP9和N-Cadherin的表达并上调E-Cadherin的表达,随后进一步验证了敲低ENC1会降低p-jnk、p-erk和p-p38的表达。这表明敲低ENC1会改变肺癌细胞表型并调节有丝分裂激活的蛋白激酶（MAPK）信号通路。而质粒过表达ENC1后,OE-ENC1转染组细胞增殖能力,迁移及侵袭能力相对于对照组都降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。最后,在小鼠肺肿瘤模型中,ENC1水平的降低抑制了肺肿瘤的生长。以上结果表明,ENC1可能是参与NSCLC发生发展的重要癌基因并成为潜在的治疗靶标。结论:ENC1参与非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,可能是非小细胞肺癌的有效阻断靶点。ENC1活性的抑制或降低可能是肺癌治疗的一个突破。
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