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目的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,患者预后差,术后复发率较高。因此,寻找预测HCC术后早期复发的肿瘤标志物对于提高患者的生存率是十分重要的。本课题组前期应用iTRAQ结合2DLC-MS/MS定量蛋白质组学技术研究广西地区人群HCC的差异蛋白质谱,发现醛酮还原酶家族1成员B10(aldo-keto reductase family 1 member B10, AKR1B10)蛋白在HCC组织中上调表达。本课题拟研究AKR1B10在HCC组织中的表达,探讨HCC组织中AKR1B10的表达水平与黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1, AFB1)暴露的关系,评估AKR1B10在预测HCC术后早期复发的价值。方法 1、收集2013年1月至2014年6月在广西医科大学附属肿瘤医院行根治性肝切除术的124例HCC患者的癌组织、癌旁组织及其组织切片,同时收集8例肝血管瘤患者的病灶旁的正常肝组织及组织切片作为正常对照。通过实时荧光定量PCR、免疫组织化学以及Western Blot等分子生物技术,在mRNA和蛋白水平检测AKR1B10在HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中的表达情况。2、通过检测HCC组织P53基因第7外显子249密码子的突变鉴定出AFB1暴露相关性HCC患者。比较AKR1B10 mRNA在AFBl暴露相关性HCC患者与非AFB1暴露相关性HCC患者的癌和癌旁组织中的表达。3、分析HCC组织中AKR1B10 mRNA的表达水平与患者临床病理特征的关系,并通过生存分析和COX风险评估模型分析AKR1B10的表达水平对HCC患者术后2年内肿瘤复发的影响。结果1、实时荧光定量PCR结果显示,AKR1B10 mRNA在HCC组织中的平均表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001),且有80.1%的HCC患者癌组织中的AKR1B10 mRNA相对癌旁组织高表达；AKR1B10 mRNA在正常肝组织中表达量较低,明显低于癌旁组织(P=0.008)。免疫组化显示,HCC组织中AKR1B10蛋白的阳性率和染色强度均明显高于癌旁组织(均P<0.001)。Western Blot结果也证实HCC组织中AKR1B10蛋白的表达高于癌旁组织。2、基因测序结果显示,P53基因第7外显子249密码子发生突变的患者有28例(即AFB1暴露相关性HCC)；未发生突变的患者有84例(即非AFB1暴露相关性HCC)。AKR1B10 mRNA在AFB1暴露相关性HCC患者的HCC组织和癌旁组织中的表达水平均明显高于非AFB1暴露相关性HCC患者(分别P：0.012,P=0.034)。在AFB1暴露和非AFB1暴露相关性HCC患者中,AKR1B10 mRNA在癌组织中的表达水平均明显高于癌旁组织(均P<0.001) 。3、AKRIB10mRNA的表达与血清甲胎蛋白浓度和乙肝病毒DNA的滴度相关。在血清甲胎蛋白<200 ng/mL的患者中,有63.7%(33/49)的患者HCC组织中的AKR1B10 mRNA高表达,明显高于高于血清甲胎蛋白≥200 ng/mL的患者(P=0.048)。在110例乙肝相关性HCC患者中,乙肝病毒DNA≥ 1000IU/ml的患者AKR1B10 mRNA的表达水平明显高于乙肝病毒DNA< 1000IU/ml的患者(P=0.046)。生存分析的结果显示,AKR1B10 mRNA低表达的患者在6、12、24个月的肿瘤复发率明显高于AKR1B10 mRNA高表达的患者(29.2%、64.6%、73.4%比23.1%、34.5%、65.7%,P=0.030)。多因素分析结果显示,肿瘤低分化、最大肿瘤直径>5cm、大血管侵犯和AKR1B10 mRNA低表达是影响HCC患者术后早期复发的独立风险因素。结论AKR1B10参与了HCC的发生,特别是AFB1暴露相关性HCC的发生,是诊断AFB1暴露相关性HCC的潜在肿瘤标志物。AKR1B10低表达提示HCC患者术后有较高的早期复发的风险。