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研究背景:瘢痕是临床上常见的疾病之一,可分为病理性瘢痕和生理性瘢痕两类。瘢痕常形成于创伤后,适度的瘢痕形成是一种生理性和自卫性的表现,但瘢痕过度增生则属于病理性的表现。病理性瘢痕一般可分为增生性瘢痕和瘢痕疙瘩,常常对患者的外观形象以及瘢痕部位的活动功能等产生不良影响,同时也会造成患者的心理负担,严重者可导致抑郁症等疾病发生。现代社会随着经济的发展和人们生活水平的提高,患者对于生活质量的要求以及美容方面的要求越来越高,因此对于病理性瘢痕的病因探索、诊断治疗新技术等的需求也更为强烈。病理性瘢痕的两大特征为成纤维细胞的过度增殖与瘢痕的类肿瘤性特征。目前研究表明成纤维细胞是创伤后创面愈合的主要修复细胞,在创面修复的过程中活化、增殖、合成胶原,其过度增殖是病理性瘢痕的一个主要特征。病理性瘢痕在病因、病理机制、临床表现、诊断和治疗等方面与肿瘤均具有相似的生物学特性,即病理性瘢痕的类肿瘤性特性。病理性瘢痕的类肿瘤性特性一方面能够较好、较全面地概述病理性瘢痕的生物学特性,另一方面强调了病理性瘢痕防治的复杂性和艰巨性,因此对于病理性瘢痕发生机制研究可借鉴肿瘤学的研究思路和成果。2005年,有学者首次在果蝇中发现Hippo信号通路传递从细胞质到细胞核的细胞信号,该通路能够调节下游基因的表达,从而调节细胞的生长、增殖和凋亡,参与调控器官大小和组织再生,在胚胎发育和组织器官形成等过程中具有重要作用。研究表明Hippo信号通路参与调解多种成纤维细胞的形态功能,同时也与肿瘤的发生、发展有直接的关系。综上所述,我们猜测Hippo信号通路在病理性瘢痕形成过程中发挥一定的作用。目前已知YAP/TAZ的表达在Hippo信号通路中发挥关键作用,因此本研究拟通过实验阐述Hippo信号通路关键性作用分子YAP/TAZ在病理性瘢痕中表达情况,探索Hippo信号通路在病理性瘢痕发生机制中的作用。目的:研究人真皮成纤维细胞及人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞中Hippo信号通路关键作用分子YAP/TAZ表达情况,并初步建立增生性瘢痕兔耳模型,检测兔耳增生性瘢痕中YAP/TAZ表达情况。方法:(1)流式细胞术检测人真皮成纤维细胞及人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞凋亡情况,免疫印迹试验(Western Blot)、逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcriotion-polymerase chain reaction,RT-PCR)、定量实时聚合酶链反应(Quantitative real time polymerase chain reaction,Q-PCR)方法检测人真皮成纤维细胞及人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞中Hippo信号通路主要作用分子YAP/TAZ表达情况。(2)兔耳瘢痕模型建立:用环钻在每只兔耳腹侧面各做6个直径6mm的圆形全层皮肤缺损创面,每个创面间隔2cm以上,去除软骨膜,创伤后约21天时取瘢痕组织做苏木素一伊红(Hematoxylin and eosin,HE)染色检测瘢痕形成情况,用Western Blot方法检测YAP/TAZ蛋白表达情况。结果:(1)人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞凋亡弱于人真皮成纤维细胞,YAP/TAZ表达人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞高于人真皮成纤维细胞。(2)兔耳创伤后约21天左右形成增生性瘢痕,HE染色显示胶原增生,成纤维细胞增生,瘢痕组织YAP/TAZ表达高于正常兔耳组织。结论:Hippo信号通路特别是其关键作用分子YAP/TAZ在病理性瘢痕发生过程中起到一定的作用。