研究背景:膀胱癌作为泌尿系统常见肿瘤,主要特点是高复发风险、高转移风险和高死亡风险。目前,膀胱癌的病因及发生机制尚不明确,尽管手术、放疗、化学治疗及免疫治疗虽然一定程度上改善了膀胱癌患者的预后,但仍不能取得让人满意的疗效。因此,开展膀胱癌基础研究,探究膀胱癌恶性进展的分子机制,可能会为膀胱癌早期诊断、结局预测提供可靠的生物标志物,并为靶向治疗提供新的研究方向。环状RNA作为一类结构特殊的RNA,不具有5’甲基鸟苷帽子和3’多聚腺苷酸尾巴,呈现为单链、共价闭合的环状结构,因其在结构、生成、调节、降解等各方面均具有独特表现,成为近年来RNA领域的研究热点。在膀胱癌中,环状RNA不仅与膀胱癌临床病理特征显著相关,而且通过各种方式参与膀胱癌的多种生物学行为。此外,由于环状RNA可高度稳定存在于外泌体,因而还可作为膀胱癌早期诊断及预后评估生物标志物。综上所述,环状RNA在与膀胱癌的发生、恶性进展、诊断及预后评估中均发挥重要作用,提示环状RNA具有成为膀胱癌治疗靶点的潜力。研究方法:本研究应用生物信息学方法分析膀胱癌与其邻近癌旁组织间差异表达的环状RNA。实时荧光定量PCR实验用于鉴定在膀胱癌细胞系及膀胱肿瘤组织中差异表达的环状RNA。运用平板克隆、CCK-8,Edu和异种移植肿瘤模型等功能实验确定hsa＿circ＿0009061敲低引起的体外和体内膀胱肿瘤细胞的生物学行为变化。生物信息学方法预测环状RNA可能结合的miRNA以及miRNA靶基因,并通过实时荧光定量PCR,RNA pulldown,Western blot和双荧光素酶报告实验探究环状RNA调控膀胱癌膀胱癌进展的机制。实验结果:我们应用生物信息学分析和RT-qPCR技术发现hsa＿circ＿0009061在膀胱癌细胞系及膀胱肿瘤组织中低表达。成功构建膀胱肿瘤细胞hsa＿circ＿0009061敲低稳转株后,应用CCK-8,平板克隆和Edu等体外功能实验发现hsa＿circ＿0009061表达降低可促进膀胱肿瘤细胞系恶性增殖,异种移植肿瘤模型发现敲低hsa＿circ＿0009061可促进膀胱肿瘤细胞在裸鼠体内增殖。机制研究表明,hsa＿circ＿0009061富含miRNA结合位点,可作为竞争性内源性RNA与hsa-miR-889-3p相结合,导致靶基因CPEB3表达变化,进而影响膀胱肿瘤的恶性进展。结论:本研究首次发现hsa＿circ＿0009061在膀胱肿瘤细胞系及膀胱肿瘤组织中低表达,并揭示其通过hsa-miR-889-3p/CPEB3轴影响膀胱肿瘤恶性增殖的机制,为膀胱癌的治疗提供了新的方向。