论文部分内容阅读
目的：本研究旨在探讨不同组成cω-3多不饱和脂肪酸对高脂膳食诱导的C57BL/6J小鼠肝脏损伤作用的影响。方法：70只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为七个组：普通组(普通饲料),高脂组(高脂饲料)、ALA组(高脂饲料+ALA)、DHA组(高脂饲料-DHA)、DHA:EPA=2:1组(高脂饲料+DHA:EPA=2:1)、DHA:EPA=1:1组(高脂饲料+DHA:EPA=1:1)、 DHA:EPA=1:2组(高脂饲料+DHA:EPA=1:2)。小鼠喂养12周,禁食隔夜,眼球取血,分离血清。肝脏固定后用于HE染色,测定血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平,测定肝脏总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、肝脏组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平；ELISA方法测定血清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β表达水平；采用实时荧光定量PCR反应测定肝脏组织中TNF-α、IL-6、IL-β、c-Jun和c-Fos基因表达,免疫组织化学染色法和Western Blot法测定肝脏组织中c-Jun和c-Fos核表达和总蛋白表达水平。结果：1.通过观察肝组织切片HE染色,可见不同组成ω-3 PUFAs对高脂诱导的C57BL/6J小鼠肝脏脂肪变性均有明显改善；五个干预组间DHA可以更好的保护肝细胞,减轻脂质沉积状况,减缓肝脏脂肪变性的发展。与高脂组相比,各ω-3 PUFAs干预组均显著降低肝脏中(P<0.01)TC、TG的含量,肝脏中脂质过氧化终产物MDA含量显著降低(P<0.05),自由基清除剂GSH含量、抗氧化酶SOD活性显著升高(P<0.05),其中DHA组效果最佳。同时各干预组可以将肝损伤标志酶ALT维持在正常范围内；与高脂组相比,各ωω-3 PUFAs干预组小鼠肝组织中AST明显下降(P<0.05),其中DHA:EPA=1:2组的ALT下降最为显著(P<0.01)。2.ω-3 PUFAs干预可减少肝脏组织细胞中c-Jun和c-Fos蛋白位移入核,各ω-3PUFAs干预组与高脂组相比,黄棕色核阳性表达明显减少,肝组织细胞c-Jun和c-Fos蛋白核内表达明显减弱,肝脏组织中c-Jun和c-Fos的mRNA表达(P<0.01)和蛋白表达(P<0.05)均显著降低,其中EPA含量较高的DHA:EPA=1:1组和DHA:EPA=1:2组,对于AP-1关键亚基的抑制最为显著。与高脂组相比,不同组成ω-3 PUFAs干预组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平及其在肝组织中mRNA表达均显著降低(P<0.01),在几个干预组中可以明显看出DHA:EPA=1:2组效果最佳。结论：不同组成co-3 PUFAs干预组可以通过调控细胞组织中AP-1异源二聚体c-Jun/c-Fos表达降低高脂诱导的肝脏损伤；在调控脂质代谢和抗氧化损伤方面,DHA干预显示出较佳保护效果,而在调控炎性损伤这方面,EPA含量较高的干预组-DHA:EPA=1:2组表现更加明显。