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鲍鱼是一种古老的海洋生物,其肉质柔嫩细滑、鲜而不腻、味感浓郁,位列海味“鲍、参、翅、肚”之首,明清时代被奉为“海八珍”之一,深受各国人们的喜爱。鲍鱼除了是一种名贵的食材之外,还具有药用价值。然而在鲍鱼的加工过程中有30%-40%鲍鱼脏器被丢弃,极少用于加工成其他副产品,导致资源的利用率降低。鲍鱼脏器中含有大量的蛋白质、丰富的维生素、生物活性物质及其他营养成分。本课题以鲍鱼脏器结缔组织为原料,通过分离制备ACE抑制效果好的鲍鱼脏器胶原多肽并测其分子量的大小。(1)通过单因素实验以ACE抑制率为指标来确定处理胶原多肽的条件:研究不同的离心分离因数、超滤膜的截留量处理后的胶原多肽对ACE抑制率效果的影响,实验得到的结果是离心分离因数为35185时,能够有效的去除样品中的色素、蛋白质及其大分子物质,此时得到的胶原多肽的ACE抑制率为32.1%,从能量消耗、实验效果等各方面考虑,超滤膜截留量为3KDa时,此事得到的胶原多肽的ACE抑制率效果较好为:40.9%。(2)在胶原多肽凝胶层析的过程中以ACE抑制率为指标。层析法以NaCl为洗脱液,研究洗脱液流速、洗脱液浓度、样品层析浓度三个因子对鲍鱼脏器胶原ACE抑制率的影响,同时进行正交实验。结果表明影响分离效果的主次因素是洗脱液浓度>样品层析浓度>洗脱液流速,并且样品层析浓度、洗脱液浓度对鲍鱼脏器胶原多肽的分离效果影响显著,洗脱液流速对鲍鱼脏器胶原多肽的分离效果影响不显著。所以鲍鱼脏器胶原多肽的凝胶层析最佳工艺条件是:样品层析浓度60mg/mL、洗脱液浓度0.1mol/L、洗脱液的流速1.0mL/min,得到的胶原多肽对ACE的抑制率为57.23%。(3)在鲍鱼脏器胶原多肽的分离过程中,研究透析时间、透析温度、透析液次数三个因子对胶原多肽脱盐率的影响同时进行单因素实验,结果表明:在分离过程中各影响因子对胶原多肽脱盐率的影响都是极显著的。(4)在单因素的基础上,利用二次通用旋转组合设计对透析时间x1、透析温度X2、透析液次数X3三个因素进行鲍鱼脏器胶原多肽ACE抑制肽的工艺优化试验,建立了鲍鱼脏器胶原多肽脱盐的回归模型方程,进行方差分析对回归方程进行拟合度显著性检验,脱盐率的回归方程:Y=87.16+3.08 x1+6.67 x2+5.17 X3+0.77 x1 x2-.78 x1 x3-1.68 x2 x3-2.39x12-8.80 x22-3.53 X32 对各指标的协同效应进行分析并以脱盐率为指标进行优化,得到的胶原多肽脱盐的最佳工艺为:透析时间8h、透析温度36.62℃C、透析液次数4次,脱盐率达到88.24%。与优化组的预测88.42%接近,证明了二次回归方程的可靠性和有效性。(6)鲍鱼脏器胶原多肽分子量的测定:利用5800MALDI-TOF/TOF质谱仪测定该样品中主要是分子量为806.45 Da、1216.56Da、911.47Da、1340.67Da的物质,也就是说主要是8-12个氨基酸残基的多肽。实验结果与相关文献相一致,说明本实验的准确性及实际指导意义。