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本研究的目的是观察ESC在体外向神经细胞定向诱导分化及自由分化过程中，Notch-bHLH信号转导系统主要成员Notch1、Mash1和NeuroD蛋白及mRNA的时空表达情况和意义，以探讨ESC神经分化的分子机制，为进一步增加ESC定向诱导分化的效率和可控性提供进一步的实验依据，并为ESC眼内移植和视网膜变性性疾病的细胞替代治疗提供坚实的理论基础。
结论：1.在体外，可不经EB阶段，应用RA直接将ESC诱导分化为神经细胞，改良的ESC诱导分化方法与传统的RA4-/4+方法效果相同，可取代传统方法。2.体外培养时间较短的P12 ESC有着高度的向神经链系定向分化发育的可能性。随着培养时间延长和传代次数增多，Notch1信号逐渐下调，ESC自发分化的可能性增加，向神经细胞定向分化的潜能有所下降。在应用ESC进行定向诱导分化和发育调控基因等研究时，应尽可能选择体外培养时间短、传代次数少、干细胞特性维持较好的细胞。3.在ESC向神经细胞诱导分化及自由分化过程中均伴有Notch1信号的逐渐关闭。Notch1可能在ESC干细胞特性的维持和向神经细胞的特异性分化中起重要作用。RA促进Notch1的下调，与Notch1的相互作用可能也是RA诱导分化的机制之一。4.在ESC向神经细胞的诱导分化及自由分化过程中，当Notch1信号开始逐渐关闭后，其下游bHLH家族成员Mash1、NeuroD迅速激活，使ESC有可能在局部微环境内诱导因素的作用下向视网膜特异性神经元，尤其是感光细胞分化发育。RA可以促进Mash1、NeuroD表达高峰的提前，并可显著提高NeuroD的表达水平，对ESC向视网膜感光细胞的特异性分化有重要的促进作用。