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第一部分NT-3抑制人神经元细胞生长的最佳作用时间与浓度目的：选择NT-3抑制人神经元细胞生长的最佳作用时间与浓度。方法：用MTT法检测了10,20,40和80nM的NT-3作用于人神经元细胞后于第2,4,6和8天计算生长率。结果：将细胞在第四天的生长情况显著高于其它组(P<0.05),而在第四天的20mM的NT-3作用细胞后的生长率显著高于其它三个浓度(P<0.05)。结论：在第四天的20nM的NT-3作用人神经元细胞后的生长率显著高效果最好。第二部分 外源性NT一3通过ERK信号通路促进神经元细胞增殖目的：通过上实验得到的NT-3对人神经元细胞作用的最佳的浓度和时间来进一步作用于该细胞,来研究其对神经元细胞生长作用是能过MAPK通路中的具体哪个途径实现在。方法：20nM的NT-3作用于人神经元细胞并于0,2,4,8和12h收集细胞,用Western blot实验分别检测了MAPK通路的关键蛋白ERK1/2,JNK,P38及磷酸化的ERK1/2,JNK,P38的表达情况。然后用RNA干扰的方法将此关键蛋白沉默,,用20nM的NT-3作用于人神经元细胞并于第2,4,6和8天检测其生长率。结果：磷酸化的ERK1/2的表达量在NT-3作用后随着作用时间的增加而增加(P<0.05)。且在6小时时达到量高而后保持不变(P<0.05)。然后将ERK1/2干扰,在干扰组中,p-p90rsk的表达是很少且不时间的变化而变化。当ERK被干扰后,细胞的生长情况没有受到影响。结论：NT-3是通过ERK通路对人神经元细胞的生长增殖起作用的。第三部分外源性NT-3通过与其受体结合后通过ERK通路促进神经元细胞增殖目的：探讨外源性NT-3通过与其受体结合后通过ERK通路促进神经元细胞增殖方法：通过RNA干扰的方法将NT-3的受体TrkC沉默,而后研究TrkC干扰后,用MTT法检测了10,20,40和80nM的NT-3作用于人神经元细胞后于第2,4,6和8天计算生长率,用Western blot实验分别检测了MAPK通路的关键蛋白ERK1/2,JNK,P38及磷酸化的ERK1/2,JNK,P38的表达情况。结果：TrkC干扰后,细胞在这八天的生长中无显著变化(P>0.05),而在这四个浓度的的NT-3作用细胞后的生长率也无显著变化(P>0.05)。磷酸化的JNK和P38在NT-3作用后0,2,4,8和12h也无显著变化。而磷酸化的ERK1/2的表达量在NT-3作用后也没有显著变化(P>0.05)。结论：外源性NT-3通过与其受体结合后通过ERK通路促进神经元细胞增殖