【摘 要】
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目的 本研究通过对华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)的测定和生物信息学分析,寻找有效的诊靶抗原基因,通过克隆和表达获得重组抗
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目的 本研究通过对华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)的测定和生物信息学分析,寻找有效的诊靶抗原基因,通过克隆和表达获得重组抗原,并对其免疫诊断价值进行初步评估;研究用华支睾吸虫单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)检测病人粪便样品中的华支睾吸虫ES抗原的方法.结论1、得到了5759个有效的华支睾吸虫ESTs;2、获得了一批潜在的与免疫诊断相关的基因;3、成功表达了6个基因,重组蛋白Cs782的ELISA结果表明它检测华支睾吸虫病患者血清抗体的阳性率为90%,与正常人血清反应阳性率为5%,可能具有一定的免疫诊断潜能;4、获得31株华支睾吸虫单克隆抗体阳性克隆,筛选出其中5株应用于病人粪便样品ES抗原的检测,其中单克隆抗体Csxj63和Csxj39有较好的敏感性(Csxj63可以检测出最少为5ng的ES抗原),具有一定的免疫诊断价值.
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