目的：　　对布鲁氏菌检测阳性及阴性的哈萨克羊个体的DRB1基因外显子3利用PCR-SSCP技术，进行多态性检测，获得多态位点；构建酿酒酵母表面展示重组表达载体 pYD1-DRB1；对绵羊 DRB1 基因外显子2两端进行点突变，引入特定酶切位点；构建绵羊DRB1基因酵母多态表面展示库；检测DRB1基因在酵母细胞表面的表达；用布鲁氏菌pmc221-GFP-M5免疫小鼠，检测外周血白细胞是否发光；探索初步构建布鲁氏菌抗原肽库的可行途径。为绵羊的育种及布鲁氏菌病的防治机理奠定基础，并提供一定的理论依据。　　方法：　　1、用虎红平板试剂盒对180只哈萨克羊样本进行布鲁氏菌检测，利用PCR-SSCP结合直接测序的方法，对哈萨克羊MHC-DRB1基因外显子3的多态位点进行检测。　　2、通过定点突变，在DRB1基因外显子2两端插入限制性酶切位点，构建绵羊DRB1基因酵母多态展示库，半乳糖诱导，通过细胞免疫荧光检测目的蛋白的表达。　　3、用布鲁氏菌pmc221-GFP-M5侵染小鼠，通过密度梯度离心分离外周血白细胞，激光共聚焦观察白细胞是否有绿色荧光。　　结果：　　1、利用虎红平板检测哈萨克羊布鲁氏菌感染率，在180只哈萨克羊中检测出146只阴性样本，34只阳性样本，阳性检出率为18.89%。　　2、利用PCR-SSCP技术结合直接测序的方法对哈萨克羊DRB1基因外显子3进行多态性检测，结果发现哈萨克羊DRB1基因外显子3中存在7个多态位点，分别是：T10C、C119T、G215C、A238G、T245G、G256A和C259T，且这些多态位点与哈萨克羊布鲁氏菌病的易感性无相关性。　　3、通过点突变成功引入了特定的酶切位点，构建绵羊 DRB1 基因酵母多态表面展示库，经半乳糖诱导表达，细胞免疫荧光检测，结果显示：绵羊DRB1基因在酵母表面成功表达并具有正确的空间构象。　　4、利用激光共聚焦观察密度梯度离心得到的白细胞，视野里有绿色荧光出现。　　结论：　　1、通过对哈萨克羊MHC-DRB1基因的外显子3序列的多态性进行检测，结果表明：哈萨克羊DRB1基因外显子3序列具有较低的多态性。　　2、成功构建了绵羊 DRB1 基因酵母多态展示库，半乳糖诱导后，在激光共聚焦下有绿色荧光出现，表明：DRB1蛋白在酵母细胞表面表达成功。说明此种方法可以适用于绵羊MHCⅡ类基因的真核表达。　　3、通过密度梯度离心，激光共聚焦下观察，检测到白细胞中有绿色荧光出现。说明pmc221-GFP-M5布鲁氏菌能成功侵入白细胞中，并使其发光。