中国荷叶资源及其生物活性研究

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荷叶在我国的分布十分广阔,其栽培面积在900万~1100万亩,主要分布于湖北、湖南、江西、福建、江苏、浙江、山东、河北等省,其中栽培面积居全国首位的湖北省栽培面积达到150万亩左右,尽管如此,我国荷叶资源的利用率却非常低,不到我国荷叶产量的1%。每年都可以看到大面积的荷叶没有采收,任其腐烂,造成极大的资源浪费,这与我国拥有的巨大荷叶资源十分矛盾。我们认为荷叶缺乏相关的高附加值深加工产品的研发,市场需求低等因素严重制约了我国荷叶资源的合理利用,所以本论文以荷叶的抗氧化、保肝、鲜肉保鲜、抗紫外辐射等活性的研究为切入点,以期为荷叶转变成为高附加值产品的重要资源提供科学依据,从而促进我国荷叶资源的合理利用。主要开展的研究工作如下:(1)采集了全国九个省,十一个荷叶主产区的荷叶药材,进行了提取物抗氧化活性以及挥发油化学成分的比较研究。结果表明,两个野生样品(白洋淀和微山湖)的总酚含量较其他产地的样品高,且在清除DPPH和ABTS自由基活性、还原力方面高丁其他主产区的样品,在抗脂质过氧化方面,十一个主产区的样品没有明显差别。挥发油的成分分析结果表明,十一个主产区的荷叶挥发油主要成分及相对含量各有不同,分别为抗坏血酸棕榈酸酯(0-33.5%),植醇(5.1-24.1%),六氢法呢基丙酮(5.6-15.3%),十五烷基丙烯酸酯(2.2-12.4%),香叶基丙酮(1.9-8.0%)和p-紫罗兰酮(0-8.0%)。通过聚类分析发现十一个样品中的藕莲品种和子莲品种分别聚类,而两个野生的样本没有显示特别的聚类信息。(2)采用体外和体内抗氧化评价方法以及液质联用分析,研究荷叶的抗氧化活性和主要可能的化学成分。体外抗氧化研究结果表明,荷叶提取物(LLE)富含酚类和黄酮类化合物,其含量分别为37.4%和20.3%;DPPH和ABTS自由基清除实验结果显示LLE有良好的自由基清除活性,其IC50值分别为4.172μg/mL和2.195μg/mL,可以与阳性对照Vc和BHT媲美;同时,LLE也显现出了良好的还原能力;在抑制脂质过氧化方面,LLE显示出了优良的抗脂质过氧化能力,其活性高于Vc,略低于BHT。体内抗氧化实验结果显示,经四氯化碳诱导的大鼠肝脏中SOD, CAT和GSH水平显著降低,MDA水平显著升高,LLE处理组对SOD, CAT、GSH和MDA水平有显著的恢复作用,表明LLE具有抵御四氯化碳导致的急性氧化损伤作用。LLE的化学成分分析结果表明其主要含有金丝桃苷,异槲皮素,紫云英苷,山奈酚,杨梅黄酮苷,儿茶素鼠李糖苷等酚类和黄酮类化合物。(3)通过大鼠急性肝损伤模型考察LLE的保肝活性,结果表明,经四氯化碳诱导的大鼠肝脏急性损伤模型中,其肝脏的谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),碱性磷酸酯酶(ALP),γ-谷氨酰转移酶(GGT)和总胆红素含量明显升高,阳性对照药物水飞蓟素和LLE的给予都对四氯化碳造成的肝脏急性损伤有不同程度的保护作用;四氯化碳造模组的肝脏病理切片中可见肝索紊乱,中央静脉扩张,肝内可见明显的片状坏死等急性损伤特征,而阳性对照药物水飞蓟素和LLE的给予都有不同程度的缓解和改善的作用。(4)通过检测加入荷叶和藕节提取物的鲜肉样本的各个氧化指标,研究荷叶和藕节提取物的鲜肉保鲜活性。结果显示荷叶和藕节提取物对新鲜猪牛肉和加热后的猪牛肉样品都有良好的鲜肉保鲜活性。在抑制肉类样品自身脂质氧化和高铁肌红蛋白的测定中,其中藕节提取物的活性高于荷叶提取物;在清除DPPH和ABTS自由基活性、还原力以及感官评价方面,荷叶提取物处理组高于藕节处理组;两种提取物体现出的活性差别可能与其主要酚类化合物类型有关,荷叶提取物主要含黄酮类化合物,藕节提取物主要含鞣质类化合物。(5)通过UVB辐射的大鼠线粒体模型,考察LLE的抗紫外辐射活性。结果显示在UVB辐射的过程中,线粒体蛋白会产生脂质过氧化氢(LOOH)、共轭二烯(CD)、4-羟基壬烯酸(4-HNE)以及硫代巴比妥酸结合物等氧化产物,同时,谷胱甘肽的含量也会明显减少,在给予LLE和阳性对照物BHT和没食子酸的辐射组,其LOOH、CD、4-HNE和硫代巴比妥酸结合物的产生量明显减少,谷胱甘肽的含量也有明显的恢复,证明LLE有良好的抗UVB辐射活性。综上所述,本工作较系统的对荷叶抗氧化、保肝、鲜肉保鲜以及抗紫外辐射活性进行了研究,为今后荷叶的相关产品开发提供了科学依据和参考,以期最终促进我国荷叶资源的有效利用和开发。
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