衰老的肝脏通常伴有形态改变以及由于脂类堆积、脂肪变性和肝纤维化等因素引起的肝损伤。研究表明,氧化应激是衰老引起器官和细胞功能下降的因素之一。氧化应激损伤生物大分子,减少蛋白质的合成,增加细胞凋亡信号传导,促进蛋白质的降解。所以,抗氧化应激可能对衰老引起的肝损伤具有一定的改善防御作用。核因子E2相关因子2(Nrf2)可通过抗氧化反应元件(ARE)诱导一系列的II相解毒酶基因。激活的Nrf2能够上调多种II相解毒酶,如血红素加氧酶-1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)等,这些Nrf2依赖的基因产物能够保护细胞氧化或外源性损伤。因此,Nrf2-ARE途径是机体重要的抗氧化防御系统之一,激活Nrf2-ARE途径可能对机体具有保护作用。研究显示,己酮可可碱(PTX)作为一个非特异性磷酸二酯酶抑制剂,是各种神经递质的调节剂。近年来研究显示PTX也具有抗氧化应激作用。然而,PTX是否能够通过激活肝脏Nrf2-ARE途径,对衰老的肝细胞起到抗氧化应激的保护作用,目前尚不清楚。目的:探讨长期PTX处理对老年大鼠肝脏形态结构和肝功能的影响及Nrf2-ARE抗氧化应激途径参与的机制。方法:成年雄性SD大鼠共30只随机分成3组。6月龄组(6Mon,n=10),24月龄组(24Mon,n=10)和24月龄腹腔己酮可可碱处理组(24Mon-PTX,n=10)。24Mon-PTX组大鼠在大鼠21月龄时腹腔注射己酮可可碱,剂量50mg/kg(0.9%生理盐水溶液),每日1次,共计给药12周(84天)。6Mon组和24Mon组大鼠同时只腹腔注射给予0.9%生理盐水溶液。每组各5只大鼠用于HE染色和免疫组织化学染色,收集静脉血用于肝功能指标测定,另外5只大鼠用于氧化应激参数、实时定量PCR和免疫印迹检测。结果:1 HE染色结果6月龄大鼠肝细胞结构清晰完整,老年24月龄大鼠肝细胞形态结构模糊、肝细胞肥大、数目减少、结缔组织增生,长期PTX处理后上述形态变化均显著改善。2肝功能检测结果与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠血液谷丙转氨酶(ALT)(P<0.01)、谷草转氨酶(AST)(P<0.01)和总胆红素(TBi L)(P<0.01)的含量显著增加,白蛋白(ALb)的含量显著降低(P<0.01),长期PTX处理后上述指标明显改善(P<0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P<0.01)。3氧化应激参数结果与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肝脏MDA水平显著升高(P<0.01),GSH水平显著降低(P<0.01),长期TPX处理后MDA水平显著降低(P<0.01),GSH水平显著升高(P<0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P<0.01)。4实时定量PCR检测结果与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肝脏Nrf2 m RNA、HO-1 m RNA和NQO1 m RNA的表达显著降低(P<0.01),长期PTX处理后上述指标表达明显增加(P<0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P<0.01)。5免疫印迹检测结果与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肝脏Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的表达显著降低(P<0.01),长期PTX处理后上述蛋白表达明显增加(P<0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P<0.01)。6免疫细胞化学检测结果与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肝脏Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的平均光密度值(AOD)显著降低(P<0.01),长期PTX处理后上述指标AOD值明显增加(P<0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P<0.01)。结论:1长期应用PTX处理能够改善老年大鼠肝脏的形态结构和肝功能。2长期应用PTX处理能够改善衰老肝脏内的氧化应激状态。3长期应用PTX处理能够激活大鼠肝脏Nrf2-ARE抗氧化应激途径。