两株甲真菌rDNAITS序列分析及系统形态学研究

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甲真菌病是由真菌引起的一种慢性、顽固、防碍美容的常见传染性疾病。本文对从甲病患者病甲中分离得到的菌株,进行个体发育学研究,弥补了当前甲真菌研究中对其分类地位确定的不完善之处,并探讨了某些分子生物学技术在甲真菌分类中的应用价值。 1.通过体外模型实验确定了菌株Fh4和菌株Dh3是引起甲部感染的病原真菌。 2.通过不同生长阶段菌体的DNA提取结果,丝状真菌DNA的提取应选在其对数生长期为好。 根据系统分类研究中的18S rDNA序列和rDNAITS序列(ITS1、5.8S rDNA、ITS2)与相关属、种的序列构建的系统发育树、序列相似性研究,菌株Fh4的分类地位应是半知菌亚门(Fungi Imperfecfi)—球壳孢目(Sphaeropsidales)—球壳孢科(Sphaeropsidaceae)—茎点霉属(Phoma)。菌株Dh3的分类地位应是半知菌亚门(Fungi Imperfecti)—丛梗孢目(Moniliales)—丛梗孢科(Monilialiaceae)—枝顶孢属(Acremonium)。 3.通过对菌株Fh4和Dh3进行了较为系统的形态学研究可知:菌株Fh4的适宜的生长条件是28℃,pH 6.5-7.0;菌落从白色变为红色再变为暗黄色;菌丝无色,具隔膜,分枝状生长;能产生关节菌丝;分生孢子单胞红色,椭圆形;分生孢子器球形,黑褐色,顶端有孔口,孢子成熟后从孔口逸出;没有发现有性阶段。菌株Dh3适宜的生长条件是:28℃,pH 6.0-7.0;在察氏培养基上菌落淡红色;营养菌丝匍匐生长,分枝、光滑、具隔膜,宽1.5μm,分生孢子梗散生,瓶梗直接从菌丝上长出,直立锥形,多单生,产孢瓶体细长28~38μm,圆柱状,分生孢子单个循序产生,形成链状,孢子椭圆形,表面光滑,4.4~5.2×1.4~2.0μm,未见厚垣孢子;未发现Dh3产生有性孢子器。 4.通过以上研究及相关资料和检索表可知:菌株Dh3应是枝顶霉属中的Acremonium egyptiacum菌株Fh4属于茎点霉属,由于茎点霉属菌种以前都是根据真菌感染的植物而命名,使得属中的同种异名现象很严重,而且到现在未见有关茎点霉属的真菌能引起甲真菌病的报道,建议给菌株Fh4新的名称。
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