中药质量评价与控制是保证中药用药安全有效的重要手段,然而现行的中药质量控制模式主要是参照化学药模式,通过定性定量测定指标性成分的方法而制订,与安全性和有效性关联不大,难以真正有效地评价和控制其内在质量,也制约了中药现代化发展。综览药物（含化学药、生物药和中药）质量控制模式和标准的发展历程,对比分析中药、化学药与生物药的生产质量控制管理模式的差异性和合理性,本课题组首次提出：借鉴生物药生产质量管理模式,建立基于道地药材和生物效价检测的中药质量控制与评价模式和方法,以补充和完善现行“成分论”的中药质量控制与评价体系。本研究以临床常用、药效确切但化学本底不清楚的板蓝根为研究对象,以抗病毒和抗菌活性为评价指标,运用多种生物检定手段,建立板蓝根质量生物检定方法,制订“板蓝根质量生物检定标准”和“板蓝根颗粒质量生物检定标准”,并应用于不同产地、不同商品规格的板蓝根药材及不同厂家、不同批次板蓝根颗粒的质量生物检定中,以达到考量其标准的合理性、可行性,不断完善修正之目的。主要研究结果如下：（1）基于神经氨酸酶（NA）活性检测的板蓝根抗病毒效价测定方法的研究：根据药物抗流感病毒活性可以通过检测NA活性的变化来表征的原理,建立了板蓝根抗流感病毒效价测定方法。研究中以“质反应平行线”原理设计和优化了试验方法,经考察该方法重复性较好（RSD=5.78%）。药理活性检测表明,板蓝根具有抑制NA的活性,代表性样品的IC₅₀=0.90±0.20mg（生药）·mL^-1。通过多批样品的效价测定,初建的方法可以对不同批次板蓝根药材的品质进行评价和区分,将其作为板蓝根生物检定方法，具有与抗病毒药效相关、易于定量、灵敏度高的特点。（2）基于红细胞凝集的板蓝根抗病毒活性限值测定方法的研究：在研究了板蓝根抗病毒活性与红细胞凝集活性呈正相关（P＜0.01,R=0.83）的基础上,具体采用了微量板凝血试验法,经条件优化和方法学验证,所建立方法的专属性、精密度、稳定性、耐受性等符合药品生物检定的相关要求。用该方法对多批次样品测定,结果可以对不同产地、不同商品规格的样品进行品质评价和区分,该方法用于板蓝根生物检定,具有与抗病毒活性相关、安全、简便易行等特点,实用性强。（3）基于管碟法的板蓝根抗菌效价测定方法的研究：该方法选用金黄色葡萄球菌为生物模型,采用一剂量法（标准曲线法）进行实验设计。经方法学验证：重复性、碟内精密度、碟间精密度均较好（RSD＜10%）,检测可信限率小于30%,符合药品生物检定的要求。通过对不同产地板蓝根样品的检测,抗菌效价值在0.11-0.93 U·g^-1之间,该方法以抗菌活性为指标,可对板蓝根药材进行质量评价与控制。（4）基于生物热动力学的板蓝根抗菌效价测定方法研究：采用生物热动力学方法,以金黄色葡萄球菌为生物模型,建立了蓝根抗菌效价测定方法。研究表明：在一定浓度范围内,板蓝根药材的对数剂量与生物热动力学参数1g(T_mas样品/T（max空白）)呈较好的线性关系（R=0.983,P<0.01），检测可信限率小于15%,精密度符合药品生物检定的相关要求。生物热力学方法用于板蓝根抗菌效价测定,与本研究的管碟法结果相关性较好（相关分析,R=0.94）,相对于只能提供单点信息的管碟法,生物热力学法具有实时在线的特点,能够提供更加全面的生物活性信息,在测定结果的指纹性、特异性、普适性、简便性上更具优势,是用于中药生物检定极具发展潜质的方法,在本文中生物热动力学法作为板蓝根抗菌效价测定的首选方法。（5）方法的应用研究：将上述既定的生物检定方法分别应用于不同产地、不同商品规格的板蓝根药材以及不同厂家、不同批次的板蓝根颗粒的生物效价测定。结果显示,板蓝根药材以GAP基地同一产区的效价值差异最小（抗菌效价RSD=10.2%、抗病毒效价RSD=11.5%）,GAP基地（包括不同产区）样品效价值较高且批次间差异最小（RSD<16.1%）,非GAP基地或散种样品批次之间差异较大（RSD>25%）,商品规格一等品绝大多数为高效价值,常规鉴别为不合格样品的效价值均最低；不同厂家的板蓝根颗粒产品间品质有一定差异,同一厂家（某大型企业）的不同批号产品效价值波动较小（RSD=7.8%～11.1%）；有糖型和无糖型之间的生物测定结果没有显著性差异（P>0.05）。结果提示,所建立方法和草拟的质量标准可以用于板蓝根药材和板蓝根颗粒的品质评价和质量控制,适用性较好。（6）板蓝根化学组分分析：分别采用UPLC法和苯酚-硫酸比色法对板蓝根中腺苷、尿苷和多糖的含量进行了测定。测定结果为,本试验所采集样品尿苷含量平均为30.9μg·g^-1（RSD=9.8%）；腺苷含量平均值为24.3 gg·g^-1,（RSD=10.5%）；多糖含量平均为242.48mg·g^-1（RSD=10.4%）。不同来源的板蓝根药材多糖、尿苷和腺苷含量变化无明显规律性,将其用于板蓝根质量控制有待于进一步研究。（7）综合分析：对板蓝根化学组分分析与抗病毒、抗菌的生物效价测定进行了多元相关分析,结果表明,各变量之间呈离散状态,相关性不明显（多元相关分析模型不成立,P>0.05）；抗病毒效价和抗菌效价之间的相关性不十分显著（相关分析R<0.70）。结果提示,本文对腺苷、尿苷、多糖的测定用于板蓝根质量控制难以与其抗菌、抗病毒药效相关联；建立的抗病毒与抗菌检定方法之间不能互相取代,而是互相补充,共同对板蓝根进行质量评价与控制。（8）基于生物检定的板蓝根质量标准和中药生物检定标准操作规程的制订：依据“选择性、可量化、灵敏性、耐用性、便捷性、普适性、经济性、安全性”的中药质量生物检定方法遴选原则,以基于红细胞凝集的抗病毒效价限值测定和基于生物热动力学的抗菌效价测定方法作为板蓝根质量生物检定的优选方法,以此为基础制订了基于生物检定的板蓝根药材和板蓝根颗粒质量标准,并制订了相应的标准操作规程,为板蓝根生物检定方法和标准的实际应用提供了依据。研究结果表明,在现有的药典常规和化学检定方法基础上,融入本文所建立的生物检定方法共同把关板蓝根质量,可以有效提高板蓝根质量控制水平,也为相关的中药质量控制研究提供了参考。