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[目的]复制睡眠呼吸暂停综合症(Obstructive sleep apnea syndrome,OS AS)的大鼠模型,监测OSAS大鼠的空间记忆学习能力变化。用Tunel染色观察大鼠海马神经元的凋亡情况,并通过检测海马区NF-κB与Bcl-2的变化探讨认知损伤的可能机制,为今后疾病的预防及治疗提供理论支持。[方法]将24只SD雄性大鼠随机分成4组,每组6只。分别为正常对照组,而模型组则按照造模后饲养时间的长短分成造模成功后2w组,4w组和6w组。模型组的制作以腹腔麻醉后咽腔注射透明质酸钠凝胶,当大鼠出现呼吸急促、反常呼吸运动时停止注射,从而造成人为的气道阻塞来模拟OSAS。模型成功的判定是对大鼠造模前及咽腔注射透明质酸钠凝胶后饲养四周分别通过多参数神经监护仪检测大鼠鼠尾的血氧饱和度,当两次比较差异有统计学意义可判断造模成功。造模成功后的大鼠分别饲养2周、4周及6周后的大鼠和正常对照组的大鼠分别进行Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)试验观察大鼠的空间学习与记忆能力变化。水迷宫试验结束处死大鼠取下海马组织进行HE染色观察形态学变化、用TUNEL染色观察海马神经元CA1区的凋亡情况。并通过免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)法观察NF-κB在海马神经细胞中的定位表达,使用蛋白质印迹法(Western Blot,WB)观察大鼠海马区NF-κB及Bcl-2蛋白的表达变化。[结果]1.通过与正常大鼠对比发现:咽腔注射透明质酸钠凝胶大鼠的反应灵敏度下降、警觉性较低、偶有呼吸急促的现象发生;多参数神经监护仪检测大鼠鼠尾的血氧饱和度提示造模前后平均血氧饱和度分别为(95.1±2.3,87.2±2.1);最低血氧饱和度分别为(87.6±2.1,75.6±2.5),造模前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.Morris水迷宫试验:(1)定位航行试验中两组实验大鼠的逃避潜伏时间随着每天重复训练的增加而不断缩短。正常对照组的平均潜伏时间为[(第一天50.3±1.3s,第二天43.9±4.4s,第三天29.8±4.4s,第四天24.2±4.7s,第五天13.6±4.1s)];2w组平均潜伏时间为[(第一天52.4±2.5s,第二天50.8±4.9s,第三天41.8±4.0s,第四天23.3±6.4s,第五天18.0±2.8s)];4w组平均潜伏时间为[(第一天58.1±6.0s,第二天56.5±10.2s,第三天45.0±7.0s,第四天30.0±4.8s,第五天25.2±8.6s)];6w组平均潜伏时间为[(第一天74.9±4.8s,第二天69.6±7.6s,第三天58.2±7.4s,第四天50.0±8.6s,第五天43.9±15.0s)]。随着饲养时间的延长实验大鼠的平均逃避潜伏时间也延长,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)空间探索试验:对照组穿越原目标平台的平均次数为4.7± 1.8次;2w组穿越原目标平台的平均次数为3.8±1.5次;4w组穿越原目标平台的平均次数为4.0±1.4次:6w组穿越原目标平台的平均次数为2.8±0.8次。结果表明OSAS大鼠穿越原目标平台的次数较正常组减少,差异具有统计学意义(P<0.05);水迷宫试验表明与正常组比较,2周组、4周组和6周组平均逃避潜伏时间明显延长,穿越平台的次数明显减少。3.HE染色显示:与正常组比较大鼠海马神经元细胞呈现出排列紊乱、细胞数目减少、细胞间隙增大,胞核破碎、固缩,且随着造模时间的延长程度加重;免疫组化显示:NF-κB在OSAS大鼠中表达增加;TUNEL染色显示:OSAS大鼠海马CA1区细胞凋亡随着饲养时间的延长凋亡增多,与正常大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果:OSAS大鼠海马区NF-κB较正常组表达增多(正常组0.738±0.022,2w组 1.078±0.014,4w组0.965±0.031,6w组0.81 1±0.336),而Bcl-2的表达呈下降趋势(正常组1.048±0.013,2w组0.525±0.020,4w组0.716±0.005,6w组0.914±0.031)。两种蛋白的表达与正常组比较差异有统计学意义,并且两种蛋白在实验组间比较差异也有统计学意义(P<0.05)。[结论]1.大鼠咽腔注射透明质酸钠凝胶可以模拟OSAS模型;2.OSAS大鼠出现空间记忆能力的损害,并且随着时间的延长损伤加重;3.OSAS大鼠认知功能的损伤可能与海马神经元的凋亡有关;4.OSAS大鼠海马神经元凋亡可能与NF-κB表达增多及抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少有关。