霍奇金病（Hodgkin’s disease，HD）是恶性淋巴瘤的一个独特类型，为欧美各国年轻人中最常见的恶性肿瘤之一，也是我国较为常见的一种淋巴造血系统恶性肿瘤，对人类的健康构成严重危害。长期以来，HD的病因和发病机制虽一直为各国学者所关注，但至今仍有许多问题悬而未决。霍奇金病组织中多种细胞相混杂，其中具有诊断意义的Reed-Sternberg细胞及其变异体Hodgkin细胞（统称H/RS）被公认为肿瘤细胞，而备受关注。然而RS细胞到底起源于何种细胞，是否为单克隆增生，尽管经过长期研究，仍未取得共识。HD中占很大比重的淋巴细胞被认为是反应性增生的，国内外还没有人特意研究过它的克隆性问题。HD的组织学特征是大量增生的淋巴细胞和很少量的“肿瘤细胞”相混杂，这与我们通常认为的肿瘤细胞呈优势生长相抵触，而且如此稀少的“肿瘤细胞”何以导致患者产生相对较大的肿瘤团块，这些矛盾不得不使人对其中大量增生的淋巴细胞的性质产生怀疑。究竟何为HD的肿瘤细胞，H/RS细胞是否确为肿瘤细胞，是本研究的目的所在。我们采用了PCNA免疫组织化学方法检测了HD中背景淋巴细胞的增生分数，又用显微切割联合PCR的方法研究了结节硬化型HD（nodular sclerosis HD，NSHD）中淋巴细胞的克隆性并与同病例 第四军医大学硕士学位论文 中的陷窝型RS细胞（陷窝细胞，Lacunar ce门）的克隆性进行比较。 主要研究内容及结果如下： 1．HD中背景淋巴细胞增生活性的研究。采用PCNA单抗分别对 10例反应性增生淋巳组织及10例皿（结节硬化型3例，混合细胞型7 例）进行兔疫组织化学染色，然后计算每例病变组织中的淋巴细胞的增 生分数，结果发现HD 组织背景淋巴细胞的平均增生分数为 （18．78L7．l）％，反应性增生淋巴组织中淋巴细胞的平均增生分数为 ＊．9714．6川。经 X‘连续性校正检验，皿中背景淋巴细胞的增生分数 显著高于反应性增生淋巴组织中淋巴细胞的增生分数（XL503．36，P ＜0．00）。且背景淋巴细胞的增生分数与低度恶性淋巴瘤的增生分数相 近，提示HD中背景淋巴细胞可能不是反应性增生的淋巴细胞。 2．结节硬化型HD中淋巴细胞及陷窝型RS细胞的克隆性检测 采取8例结节硬化型HD切片行苏木素伊红染色，染色后不加盖 玻片，首先对陷窝细胞进行显微切割，切割后再对切割空隙周围的淋 巳细胞群进行显微切割，将切割下的细胞搜集到EPpendorf离心管oP 管）中。将切割下的细胞分为两组，一组用 IgH基因重排引物，另一组 用 TCR Y基因重排引物进行扩增，结果发现 8例结节硬化型皿中有 6 例淋巴细胞存在克隆性 IgH重排，所有陷窝细胞为多克隆性 IgH重排， 2例淋巴细胞有 TCR Y重排，陷窝细胞未检测到 TCR Y重排。用 B和 T 细胞淋巴瘤做为单克隆对照，用反应性增生淋巴结做为多克隆对照。 单克隆与多克隆及阴性对照结果明确。这一研究结果表明 NSHD中 H川S 细胞变体的陷窝细胞为多克隆性，单克隆起源肿瘤细胞为B淋巳细胞。 综上所述，结节硬化型HI）中背景B淋巴细胞可能为肿瘤细胞， 同时也对陷窝细胞的肿瘤性质提出质疑。