苦荞（Fagopyrum tataricum（L.）Gaertn）是我国特有的杂粮作物,是淀粉类粮食作物中营养最丰富的品种之一,但其含有蛋白酶抑制剂、植酸等抗营养因子,营养价值还有待于改善。苦荞萌发后抗营养因子降解或消失,同时还能富集γ-氨基丁酸（GABA）、黄酮等功能性成分,受到研究者的关注。高等植物中的GABA由GABA支路途径合成,该途径的GABA-T（EC2.6.1.19）为GABA转化的限速酶。本文研究了发芽苦荞中GABA-T的酶活测定条件的优化、酶学特性以及ORF序列的克隆。主要研究成果如下:（1）对发芽苦荞中GABA-T的酶活测定条件进行了优化。GABA浓度、丙酮酸浓度、温度和pH值四个因素对酶活的影响都达到了极显著的水平,四个因素对酶活的影响顺序由大到小为:pH值>温度>丙酮酸浓度>GABA浓度。发芽苦荞中GABA-T酶活测定最佳条件为GABA浓度为12 mmol/L,丙酮酸浓度为6 mmol/L,温度为 38℃和 pH 为 8.6。（2）对发芽苦荞中GABA-T进行了分离并研究了其酶学特性。通过（NH4）2SO4对发芽苦荞GABA-T进行盐析,使得发芽苦荞GABA-T得到了进一步纯化,发芽苦荞GABA-T纯化回收率为79.37%,纯化倍数为4.24倍,纯化效果较好。发芽苦荞GABA-T的热稳定性较差,为不耐热酶,50℃时酶几乎完全失活;碱性环境有利于苦荞GABA-T,在pH范围内（pH8.5～9.5）都较稳定,能保持80%以上的酶活力。采用Lineweaver-Burk双倒数作图法测定发芽苦荞GABA-T的动力学常数:发芽苦荞GABA-T对GABA的Km值为20.47 mmol/L,Vmax 为 5.22nmol/min;对丙酮酸的Km值为 12.33 mmol/L,Vmax 为 4.41 nmol/min。相比较底物GABA,苦荞GABA-T对底物丙酮酸的亲和力更高。金属离子Mn2+、Mg2+、Zn+和Al3+,在添加2 mmol/L的浓度下,对发芽苦荞GABA-T活力没有显著影响;2mmol/L的EDTA对发芽苦荞GABA-T活力影响也不大。K+、Na+、Cd2+、Cu2+、Ag3+和SDS 对苦荞 GABA-T 有较强的抑制作用,Tris、vinyl-GABA（VGB）、对羟基苯甲醛和黄芩素,对苦荞GABA-T均有明显的抑制作用。（3）采用RT-PCR和RACE技术,克隆发芽苦荞FaGABA-T基因。将中间序列与3’RACE产物拼接,得到一个长为1556 bp的FaGABA-T基因,包含了一个长度为1347bp的完整的ORF,其编码一个全长为448个氨基酸的蛋白,预测分子量49.18939 kDa,理论等电点（pI）为6.28。对发芽苦荞FaGABA-T基因进行了同源性及进化树分析:在核苷酸水平上,发芽苦荞FaGABA-T核苷酸序列与菠菜（Spinaciaoleracea）GABA-T3 和蓖麻子（Ricinus communis）GABA-T1序列相似度分别为82.79%和80.31%。在氨基酸水平上,发芽苦荞FaGABA-T 与菠菜（Spinaciaoleracea）GABA-T3、欧洲栓皮栎树（Quercussuber）GABA-T3 和藜麦（Chenopodiumquinoa）GABA-T3 序列相似度分别为 87.05%、86.83%和86.16%。进化树的分析结果发现,发芽苦荞FaGABA-T与甜菜、藜麦和菠菜的GABA-T为同一分支,表明它们基因可能具有相同的起源并且发芽苦荞FaGABA-T基因与甜菜、藜麦和菠菜的基因亲缘性最近。