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自从发现酶在非水相体系中仍具有催化活性并且会改变酶的催化特性,为了改进酶的催化效率,人们不断开发了新型的反应体系。三液相酶催化体系(Three-Liquid-Phase System,TLPS)是一类新开发的酶催化体系,目前对于利用该类体系进行催化的研究报道不多,关于界面酶在其中的催化性质研究未见报道。本文构建了三液相体系,研究了界面酶包括脂肪酶和磷脂酶在三液相体系中水解油脂,主要的研究结果如下:以脂肪酶AYS为例,考察了三液相体系对界面酶酶学性质及稳定性的影响,研究发现,不同类型的三液相体系对酶的活性影响较大,相比于离子液体型和短链醇型三液相体系能抑制酶的活性,聚合物型三液相体系却能对酶的活性有促进作用,考察了酶在缓冲液和TLPS中的酶学性质变化,研究表明酶在TLPS中最适pH由7变为5,均是在碱性条件下稳定,相比于缓冲液,酶在TLPS中Km降低为原先的一半,为0.47mmol/L。在三液相体系和油水体系中水解含中短链脂肪酸的橄榄油来评价酶的水解能力,研究结果表明,三液相体系中的水解效率要高于油水体系,并比较了三液相体系和油水体系水解鱼油富集n-3 PUFA的差异,结果表明TLPS中n-3 PUFA富集率是油水体系的3.63倍,综合考察了成相盐,亲水性溶剂的添加量,pH值,转速,反应时间对酶催化行为的影响。考察了三液相体系中酶的重复利用性,结果显示酶在使用八次后,活性未明显损失。粒径分析结果表明相比水,鱼油在TLPS的中相中具有更大的比表面积,激光共聚焦结果显示,在三液相体系中,乳化液滴具有独特的球壳结构。在三液相体系中进行双酶的联合催化,以水解米糠油为例,加入磷脂酶和脂肪酶,实现米糠油的脱胶和水解同步进行,SDS-PAGE电泳结果和酶活分析结果表明,脂肪酶和磷脂酶均可被富集到中间相。考察了盐,亲水性溶剂添加量,双酶比例,转速等因素对双酶催化的影响,同时也考察了双酶的重复利用性,发现双酶在经过7次重复使用后活力仍保留有90%以上。