目的：构建HPV16无佐剂治疗性重组蛋白疫苗Hsp65-E6/E7表达载体，筛选稳定的高表达该疫苗的菌株，优化Hsp65-E6/E7重组蛋白疫苗的纯化和复性技术条件，研究该疫苗抗HPV16型病毒相关肿瘤的生物学效应。方法：通过PCR技术自我国山西宫颈癌高发现场分离到的毒株-HPV16Z中获得E6/E7转化基因片段，自卡介苗菌株中克隆获得Hsp65基因片段；对E6/E7基因片段定点突变修饰，以消除该转化基因的致癌潜能；构建ET28a-Hsp65-E6/E7表达载体，在大肠杆菌BL21(DE3)中表达融合蛋白，并筛选稳定的高表达菌株；研究影响Hsp65-E6/E7重组蛋白疫苗的表达条件；研究和初步建立重组蛋白疫苗的纯化方案和工艺；研究重组蛋白疫苗诱导的细胞特异性免疫反应和该疫苗对小鼠TC-1肿瘤细胞移植瘤的体内治疗作用。结论：获得稳定高表达Hsp65-E6/E7重组蛋白疫苗的大肠杆菌BL21(DE3)株；优化了发酵、表达、复性和纯化工艺，使该疫苗纯度达95％以上；体外实验证实该疫苗有较强的免疫原性，能激发特异性细胞免疫反应；体内有效抑制HPV16阳性TC-1肿瘤细胞生长。该项研究为无佐剂治疗性重组蛋白疫苗Hsp65-E6/E7的进一步研发奠定了基础。