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一、目的和意义近年来,毒物对血红素氧化酶(heme oxygenase,HO)蛋白和mRNA表达影响的报道陆续出现,HO系统在毒作用机制中的作用越来越引起人们的重视[2].HO有三个亚型,其中HO-1为诱导型,HO-2为结构型,HO-3与HO-2相似,但活性较弱.对HO-1的研究最多最深入,普遍认为其具有抗炎、抗凋亡、抗增生等多种重要的生理病理作用.该研究主要以体外培养的H4人神经胶质瘤细胞系为模型,以HO-1为线索,研究HO-1在软骨藻酸兴奋性神经毒性中的作用及机制.二、研究方法1.免疫组化技术研究软骨藻酸对小鼠脑组织HO-1蛋白的影响.2.免疫组化、FCM、RT-PCR检测软骨藻酸对H4神经胶质瘤蛋细胞HO-1蛋白、mRNA及活性表达的影响.3.采用MTT法和TBA法研究HO-1在软骨藻酸对H4神经胶质瘤蛋细胞存活率及氧化损害影响中的作用.4.单细胞凝胶电泳法研究HO-1在软骨藻酸对H4神经胶质瘤蛋细胞DNA损伤中的作用.5.荧光分光光度法测定HO-l在软骨藻酸对H4神经胶质瘤蛋细胞游离钙影响中的作用.6.高效液相色谱法测定HO-1在软骨藻酸对H4神经胶质瘤蛋细胞氨基酸递质影响中的作用.