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一叶萩碱是一种GABA受体特异性拮抗剂,具有显著的中枢神经系统兴奋作用,已经成为神经内科重要的临床用药、及常用的工具药。最新的研究结果还表明,一叶萩碱能显著改善学习、记忆,有可能发展成为预防及治疗老年性痴呆症(Alzheimer’s disease,AD)的药物。除此之外,一叶萩碱还被发现具有抗肿瘤、抗疟、抗细菌、抗病毒等广泛的生物活性。因此,近年来关于一叶萩生物碱的研究增长很快。一叶萩碱在一叶萩植物中的生物合成显示了十分独特的旋光现象:不同地区的同种一叶萩植物能特异地生物合成不同旋光的一叶萩碱。另外,一叶萩碱化学结构的刚性和手性使得化学全合成和化学衍生难度很大。因此,对一叶萩生物碱手性生物合成机理的研究无疑具有重要的理论意义和应用价值。本文对一叶萩碱生物合成及生物转化进行了研究,包括以下四个方面的工作内容: 1.一叶萩植物愈伤组织的培养和一叶萩碱的积累 采集了三个不同来源——河北省兴隆县、北京市密云县、北京市房山区上方山的一叶萩植物,诱导获得了三个一叶萩愈伤组织的细胞株。确定了适合组织培养样品处理及其一叶萩碱含量的RP-HPLC分析方法。通过多种波谱学手段确证了诱导自北京市密云县的一叶萩愈伤组织中积累右旋一叶萩碱;建立了应用一种手性溶解剂(S)-(-)-N-邻苯二甲酰丙氨酸((S)-(-)-N-Phthalylalanine)鉴定一叶萩碱样品光学纯度的方法。对影响愈伤组织生物量积累及一叶萩碱含量的多个因素——光照、基本培养基、蔗糖浓度、激素配比等进行了研究。结果表明,光照、MS基本培养基、5%蔗糖浓度、16.11μM NAA和2.32μM KT的激素配比为愈伤组织生长和一叶萩碱积累的最适条件。