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肿瘤目前仍是临床难以治疗的疾病之一,对人类的健康有极大的危害,其临床治疗方法主要有手术、化疗、放疗等,在发挥治疗作用的时候,不仅有较差的特异性,还可能损伤机体的免疫功能,使病人恢复缓慢,即给病人带来生存希望的同时也给病人带来较大的创伤。因此,筛选一种具有高效、低毒、低成本等特点且能有效治疗恶性肿瘤的天然药物成了药物研究者刻不容缓的责任。桦褐孔菌(Inonotus obliquus(Fr)Pilát),又名斜生纤孔菌、桦癌孔菌、茶卡(Чага)和蔷甘等,在俄罗斯被俗称为chaga,属于锈革孔菌目Hymenochaetales的锈革孔菌科Hymenochaetaceae,多分布于北纬45~50°的地区,其主要成分多糖具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖和免疫调节等生理功能。目前有关桦褐孔菌的研究多集中于单一成分的分离纯化及结构研究,鲜少对桦褐孔菌提取物进行综合性的研究报道,而传统天然药物以其整体疗效最为显著。本研究以采摘自中国大兴安岭的桦褐孔菌为原材料,对其多糖(IOPS)的提取工艺、体内外抗癌活性、毒理学特性等进行研究,获得以下研究结果:1.确定了桦褐孔菌多糖(IOPS)的最佳提取工艺以采自大兴安岭的桦褐孔菌为原料,将其粉碎至细粉后采用纤维素酶辅助水提醇沉法提取水溶性多糖,苯酚-硫酸法测定提取物的总多糖含量。在单因素实验的基础上采用响应面分析法中的Box-Behnken设计法优化IOPS的最佳提取工艺。确定料液比1:30,提取温度90℃,提取时间5 h,酶解时间65 min为最佳提取条件,该条件下多糖得率理论值为3.598%,实际测得多糖得率为(3.575±0.24)%;经sevage法除蛋白后,所得IOPS中多糖纯度为(66.80±1.46)%。2、明确了桦褐孔菌多糖(IOPS)及其含药血清体外抗癌活性CCK-8法检测IOPS及其含药血清在体外对HepG2、MCF-7两种肿瘤细胞的生长抑制活性,并用AO/EB染色法检测细胞的凋亡情况。结果表明,不同剂量IOPS对MCF-7、HepG2细胞均没有明显的抑制作用,而高、中剂量IOPS含药血清作用于HepG2、MCF-7细胞48 h和72 h后,细胞生长抑制率均大于50%,结合AO/EB染色结果,可知IOPS含药血清对肿瘤细胞的抑制作用明显,且与剂量呈正相关。3、成功评价桦褐孔菌多糖(IOPS)对荷瘤动物的体内抗癌活性采用皮下接种法构建HepG2裸鼠肝癌动物模型,分别灌胃给予荷瘤鼠不同剂量的IOPS。结果表明,IOPS对荷瘤鼠的抑瘤作用呈剂量依耐型,高、中、低剂量IOPS对雌性荷瘤鼠的抑瘤率(TIR)分别为56.63%、38.00%和36.64%,对雄性荷瘤鼠的抑瘤率(TIR)分别为64.37%、38.49%和40.13%;CTX和(CTX+IOPS)组对雌性和雄性荷瘤鼠的抑瘤率(TIR)分别为84.53%和84.27%,70.01%和73.01%;与模型组相比,雌性荷瘤鼠给药组瘤重均呈极显著性差异(P<0.001),雄性荷瘤鼠的IOPS高剂量组、CTX组和(CTX+IOPS)组瘤重呈极显著性差异(P<0.001);ELISA检测结果显示IOPS剂量的增加可显著提高实验动物血清中IL-2和TNF-α释放水平;HE染色法制作肿瘤组织和肝脏组织切片,发现IOPS可明显改善荷瘤鼠肝细胞的变形坏死,具有显著的保肝作用。4、肯定了桦褐孔菌多糖(IOPS)的毒理学特性采用MTT法检测IOPS对正常肝细胞LO2的细胞毒性,通过小鼠急性毒性试验、小鼠精子畸形实验对IOPS的急性毒性和遗传毒性进行评价。结果表明,IOPS对LO2细胞无明显抑制作用;IOPS在日剂量5000 mg/kg时实验小鼠未表现出任何中毒反应,表明IOPS属无毒物质;小鼠精子畸形实验中,阴性对照组与CTX组相比有显著性差异(P<0.05),与IOPS组相比无显著性差异(P>0.05),表明IOPS无遗传毒性。