HF-LPME/CE联用技术对无创体液中生物标志物的应用研究

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第一章绪论毛细管电泳(CE)自上世纪80年代以来,由于分离模式多样,可与多种检测器联用,使其得到了迅速发展。其中安培检测器(AD)可以选择性的灵敏检测电活性物质,CE与AD的联用技术(CE-AD)在生物医药等研究方向中已经成为常用技术。然而,样品预处理逐渐成为分析测定基质复杂、含量低的被测物的过程中不可或缺的重要一环。中空纤维膜液相微萃取技术(HF-LPME),由于其效率高且易操作、同时有纯化和富集功效以及环境友好的特点,从众多微萃取技术中脱颖而出。本章在对CE-AD技术的原理及应用范围进行简单概述的基础上,从液相微萃取的进展过程、分类和实际应用,以及纳米粒子在中空纤维膜微萃取技术中的应用新进展四方面进行了着重评述。本论文结合富集纯化效率高的HF-LPME技术与灵敏检测的CE-AD技术,通过优化萃取模式提高纯化与富集选择性,在无创体液生物潜在标志物痕量分析方面开展了相关研究工作。第二章基于盐效应增强HF-LPME/mini-CE-AD联用技术对唾液中巯基生物标志物的分析方法研究本项工作建立了一种HF-LPME与微型毛细管电泳-安培检测系统(mini-CE-AD)联用的方法来分析唾液中的还原型谷胱甘肽(GSH)。通过调节给出相p H至等电点和增强盐效应等优化手段,GSH能被富集至471倍,并且富集液可以直接进行电泳分析。盐效应增强的HF-LPME/mini-CE-AD方法已成功应用于唾液分析,在实际样品中的LOD为0.46 ng/m L(S/N=3),回收率为92.7~101.3%。此方法的样品预处理步骤简单,不需要进一步衍生化,可为进一步开发便携式仪器对无创体液进行分析提供思路。第三章基于ZIF-8-HF-LPME/CE-AD联用技术对尿液中全谷物代谢标志物的分析方法研究全谷物摄入与人体健康密切有关。本论文采用沸石咪唑酯骨架-8(ZIF-8)纳米粒子增强的HF-LPME技术,对全谷物摄入量的游离尿样代谢标志物进行纯化和富集条件优化,并采用CE-AD技术直接对富集液进行分析。由于三相动态ZIF-8-HF-LPME与瞬态移动化学反应界面电泳在线富集的协同作用,3,5-二羟基苯甲酸(DHBA)和3-(3,5-二羟基苯基)丙酸(DHPPA)的富集倍数为1018~1034倍,在尿液复杂基质中的检测限达到0.33~0.67 ng/m L(S/N=3)。该方法已成功应用于尿液中目标物的含量分析,样品回收率在97.0~103.5%之间。该方法具有快速、低成本、环境友好等特点,为灵敏检测全谷物摄入量的尿样代谢标志物提供了一种新颖的替代方法。
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