羟基脯氨酸双酯的脂肪酶促合成、表征及功能分析

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肉豆蔻酰正十二醇羟基脯氨酸双酯是一种抗衰老药物,可广泛用于医药、化妆品、食品及化工等领域。本文先以L-羟基脯氨酸和苯甲酸十二醇酯为原料,脂肪酶为催化剂,环己烷为溶剂合成羟基脯氨酸正十二烷基酯;然后再与肉豆蔻酸在脂肪酶催化下合成肉豆蔻酰正十二醇羟基脯氨酸双酯。并研究反应时间、反应温度和底物配比对转化率影响。L9(33)正交实验结果指出,合成羟基脯氨酸正十二烷基酯的最佳工艺条件为:反应时间60小时,温度45℃,底物羟基脯氨酸与苯甲酸十二醇酯的摩尔比为1:3。在该最优条件下合成羟基脯氨酸正十二烷基酯,以苯甲酸十二醇酯计的转化率为75.57% ;温度是影响合成肉豆蔻酰正十二醇羟基脯氨酸双酯的最显著因素,合成肉豆蔻酰正十二醇羟基脯氨酸双酯的最佳工艺条件为:反应时间8小时,温度60℃,羟基脯氨酸正十二醇酯与肉豆蔻酸的摩尔比为1:4,在该最优条件下合成肉豆蔻酰正十二醇羟基脯氨酸双酯,以肉豆蔻酸计的转化率为78.5%。单酯及双酯合成物的薄层或柱层析分离条件为:乙酸乙酯:冰醋酸:水(体积比4:1:2),其Rf值分别为0.45和0.93,晶体分别为棒状和薄长方块体;熔点分别为52-54℃和43.5-44℃;油/水分配系数分别为0.5和0.7;累积透皮吸收率分别为60.43%和36.39%。纯化的单酯及双酯合成物经红外、核磁共振波谱、质谱分析,确证分别是羟基脯氨酸正十二烷基酯、肉豆蔻酰正十二醇羟基脯氨酸双酯。羟基脯氨酸正十二烷基酯的仲羟基和亚氨基,肉豆蔻酰正十二醇羟基脯氨酸双酯的亚氨基均可提供质子,还原强氧化性的超氧阴离子(O2-·),终止自由基链式反应。同时,谁能提供孤对电子,与具空轨道的金属离子形成螯合物,阻止羟基自由基(·OH)产生。当单酯或双酯的浓度均为10 mg/mL时,对O2-·的清除率分别为67.16%和52.26%,对·OH的清除率分别为62.14%和76.54%。
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