论文部分内容阅读
目的:对4周慢性不可预见温和应激（Chronic unpredictable mild stress,CUMS）致抑郁样行为大鼠进行不同时期有氧运动干预,探讨不同时期有氧运动干预对CUMS大鼠海马神经炎症的影响机制。方法:将48只3月龄雄性SPF级SD大鼠随机分为4组（n=12）:空白对照组（C）、抑郁模型组（D）、抑郁+游泳组（E1）及抑郁后游泳组（E2）。各组按照不同实验目的进行4周的CUMS刺激及在不同阶段进行4周的游泳运动干预。各组大鼠造模结束后分别采用糖水消耗实验（SPT）、旷场实验（OFT）及ELISA检测全脑5-HT、NE以验证CUMS模型是否成功。采用分子实验Real-time PCR、Western Blotting、免疫荧光（IF）、HE染色观察大鼠海马形态结构及相关指标的表达。结果:（1）一般状态:C组情绪稳定,活泼健康,毛发光滑,饮食正常,大便呈颗粒状。D组情绪暴躁好斗,食量下降,毛发脱落,体态消瘦,大便不成形。E1、E2组状态稍差于C组。（2）体重增长:造模前各组大鼠体重增长无差异（P>0.05）。造模后D、E1、E2组体重增长显著低于C组（P<0.01）,运动干预后E1组体重增长显著高于C、D、E2组（P<0.01）,E2组显著低于C、D组（P<0.01）。（3）SPT:各组大鼠总饮水量无显著性差异（P>0.05）。D、E1、E2组白水消耗显著高于C组（P<0.01）,E1、E2组显著低于D组（P<0.01）,E2组显著高于E1组（P<0.05）。D、E2组糖水消耗显著低于C组（P<0.01）（P<0.05）,E1、E2组显著高于D组（P<0.01）。D、E1、E2组糖水消耗比显著低于(C组（P<0.01）,E1、E2组显著高于D组（P<0.01）。（4）OFT:D、E1、E2组活跃度显著低于C组（P<0.01）,E1、E2组显著高于D组（P<0.01）。D、E2组总路程显著低于C、E1组（P<0.01）（P<0.05）。D、E2组平均速度显著低于C、E1组（P<0.01）（P<0.05）。C、E1、E2组中央区域时间显著高于D组（P<0.01）,E2组显著高于C组（P<0.05）。C、E1、E2组中央区域路程显著高于D组（P<0.01）。（5）ELISA:C、E1、E2组全脑5-HT含量显著高于D组（P<0.01）。D、E2组全脑NE含量显著低于C组（P<0.01）,E1、E2 组显著高于 D 组（P<0.01）。（6）RT-PCR:C、E1、E2 组 IL-1β mRNA表达显著高于D组（P<0.01）。C、E1、E2组IL-10 mRNA表达显著高于D组（P<0.01）,E1、E2组显著高于C组（P<0.01）,E1组显著高于E2组（P<0.01）。D、E2 组 GFAP mRNA 表达显著低于 C、E1 组（P<0.01）。E1、E2 组 CD11b mRNA表达显著低于D组（P<0.01）。（7）WB:D组IL-1β蛋白表达显著高于C、E1、E2组（P<0.01）。D组IL-10蛋白表达显著低于C、E1、E2组（P<0.01）。D组GFAP蛋白表达显著低于C、E1、E2组（P<0.01）。D组CD11b蛋白表达显著高于C、E1、E2组（P<0.01）。各相关蛋白在海马中的表达C、E1、E2组均无显著性差异（P>0.05）。（8）IF:C、E1、E2组IL-1β IOD值显著高于D组（P<0.01）（P<0.05）,且 C、E1、E2 组无显著差异（P>0.05）。C、E1、E2 组 IL-10 IOD值显著高于D组（P<0.01）（P<0.05）,且C、E1、E2组无显著差异（P>0.05）。（9）HE:C组海马DG区神经元数量较多,神经元排列紧密且整齐有序。D组海马DG区神经元数量最少,神经元排列松散且顺序混乱。E1、E2组海马DG区神经元数量较多但较C组少,神经元排列紧密且整齐有序。（10）相关性分析:IL-1β蛋白表达与中央区域时间呈负相关（r=-0.579,P<0.01）,与糖水消耗比高度负相关（r=-0.702,P<0.01）。IL-10蛋白表达与中央区域时间高度正相关（r=0.632,P<0.01）,与糖水消耗比高度正相关（r=0.753,P<0.01）。IL-1βmRNA表达与中央区域时间高度负相关（r=-0.648,P<0.05）,与糖水消耗比高度负相关（r=-0.623,P<0.05）。IL-10 mRNA表达与中央区域时间高度正相关（r=0.640,P<0.01）,与糖水消耗比呈正相关（r=0.508,P<0.01）。结论:（1）4周的CUMS刺激使大鼠出现一般状态变差,体重增长缓慢,对奖励机制及新鲜事物丧失兴趣,全脑5-HT、NE表达下降等现象,表明为期4周的CUMS刺激可致大鼠出现抑郁样行为,即大鼠造模成功。（2）4周的CUMS刺激使大鼠海马IL-1β、CD11b表达上调,IL-10、GFAP表达下降,表明神经炎症的激活可能是导致抑郁样行为产生的机制之一。（3）CUMS刺激过程中及CUMS刺激之后进行有氧运动均使CUMS大鼠海马IL-1β、CD11b表达下降,IL-10、GFAP表达上调。提示规律的有氧运动能有效缓解由中枢炎症引发的抑郁样行为。表明中枢炎症的改善可能是缓解抑郁样行为的神经生物学机制之一。（4）CUMS大鼠旷场中央区域时间减少、糖水消耗比减小与海马IL-1β蛋白、IL-1β mRNA表达的升高及IL-10蛋白、IL-10 mRNA表达的降低相关。表明IL-1β及IL-10在海马的表达与抑郁样行为相关。