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第一部分肝癌超声血运分级与血管生成的相关性研究目的:探讨超声血运分级与基质金属蛋白酶9(MMP-9)在原发性肝癌(PHC)血管生成中的相关性。方法:选取大连医科大学第二附属医院60例原发性肝细胞癌手术的患者,且术前均行超声检查,记录经超声检查所有患者病灶内血流信号分级情况。取所有患者的肿瘤组织,运用免疫组织化学法检测MMP-9和CD31的表达,并计算微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:肝癌超声血运分级及相应MMP-9、MVD表达情况:0级13例,47.51%、20.57±2.26;1级22例,73.06%、39.32±3.71;2级15例,81.32%、62.25±3.80;3级10例,99.84%、85.16±2.33。MMP-9在肝癌的表达率为73.06%,MVD为48.63±3.19。肝癌病灶内超声血运分级与MMP-9的表达和MVD呈正相关(r=0.56,P<0.05)。结论:肝癌超声血运分级情况能较好地显示病灶内血管的变化,对肝癌的诊治及临床评估血管生成指标有一定的意义。第二部分兔肝VX2肿瘤射频消融术后残癌中基质金属蛋白酶9表达目的:探讨兔肝脏VX2肿瘤射频消融术(radio-frequency ablation,RFA)后残余肿瘤组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。方法:超声引导下将VX2肿瘤组织块接种于23只新西兰大白兔肝脏中,造模成功后随机分为5组,对照组(A组,n=3),不行RFA治疗;余20只为实验组行RFA治疗,在超声引导下射频针插入肿瘤偏心位置,展开电极致损毁范围最大为肿瘤总体积的2/3,人为造成残存肿瘤组织。根据治疗结束后不同时间点分为4组:0小时组(B组,n=5)、术后1周组(C组,n=5)、术后2周组(D组,n=5)、术后4周组(E组,n=5),行超声检查结束后处死,取肿瘤组织行免疫组化法观察残存肿瘤组织中及未治疗肿瘤组中MMP-9的表达情况。结果:1.造模结果:接种成功后14-20天行超声检查,超声显示肝脏内见圆形或类圆形低回声团块,为直径1.5±0.5cm,边界清,无包膜,内可见丰富的血流信号,为动脉频谱。2. RFA术后超声结果:射频治疗后0h肿瘤治疗区呈不规则强回声,边界不清,形态不规则,彩色多普勒(CDF)和能量多普勒(CDE)无血流信号。术后1w、2w、4w肿瘤大小与射频治疗前相似,射频区为不规则高回声,内可见不规则无回声,射频后1w、2w时CDF和CDE未探及明显血流信号,4w时CDE部分残癌的周边可见血流信号。3.免疫组化结果:A组MMP-9在肝癌组织中呈高表达,为70.5±29.3%;B组MMP-9在残癌中阳性表达率为42.2±23.4%;C组MMP-9在残癌中阳性表达率为37.6±18.7%;D组MMP-9在残癌中阳性表达率为35.0±13.5%;E组MMP-9在残癌中阳性表达率为31.1±11.2%;B组至E组MMP-9在射频消融区呈逐渐减低表达趋势,且随时间延长呈逐渐递减趋势。结论:RFA治疗后残存肿瘤细胞中MMP-9水平表达减低