白背飞虱、灰飞虱Doublesex基因分析

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白背飞虱Sogatella furcifera(Horváth)、灰飞虱Laodelphax striatellus(Fallén)同属于半翅目(Hemiptera)飞虱科(Delphacidae),近几十年来这两种飞虱已逐渐成为威胁我国水稻产量的重要害虫。Doublesex基因作为昆虫性别决定和性别分化的连接点,是昆虫性别决定中的关键性基因,对昆虫种群繁衍具有重要作用。因此,对白背飞虱和灰飞虱中同源的dsx基因进行研究,可以帮助我们更好地理解飞虱体内dsx的调控机制,为半翅目飞虱的性别决定机制的研究提供基础,从而为害虫遗传防治提供理论依据。本研究通过序列分析构建了白背飞虱dsx基因的四种可变剪接模式图;结构域分析发现这四种剪接体均含有昆虫dsx基因共有的DM/OD1保守结构域,但白背飞虱中并没有昆虫dsx基因所共有的OD2区域,这预示着半翅目白背飞虱的性别决定机制与已经研究过的昆虫的性别决定机制可能存在差异;同源性分析结果表明雌雄共有区段OD1结构域还是比较保守的,关键性的氨基酸残基都是具有高保守性的,白背飞虱的雌性特异性区段明显不同于其它昆虫,不同昆虫间雄性特异性区段是具有很大差异的。利用半定量PCR技术,鉴定得到SfdsxF1、SfdsxF2是白背飞虱雌性可变剪接体,SfdsxM1、SfdsxM2是白背飞虱雄性可变剪接体。利用RNAi技术干扰了白背飞虱dsx基因共同区段和雄性特异性区段的表达,发现3龄若虫dsx被干扰后的白背飞虱雄成虫内外生殖系统均出现异常,而对雌虫内外生殖系统没有影响,雄性特异性区段干扰后对雄虫的体节和足的发育均有影响,因此该基因可能对雄虫的生殖系统发育具有调控作用;此外,我们通过灰飞虱转录组筛选获得了与白背飞虱dsx基因具有高度同源性的序列Ls3901,对Ls3901进行初步功能分析,结果表明Ls3901与白背飞虱dsx具有相同的功能。本研究有望为半翅目稻飞虱性别决定机制的研究提供基础,从而为白背飞虱和灰飞虱的防治提供新的思路。
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