论文部分内容阅读
目的姜黄素(curcumin)是从中药姜黄属植物姜黄的根茎中提取的一种酚性色素,能够抑制多种肿瘤细胞的增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,对正常组织器官无明显毒副作用。顺铂为肺癌化疗的常用药物,姜黄素与顺铂联用是否会增强顺铂对肺癌的杀伤效应?目前尚无这方面的研究报道。线粒体是真核细胞重要的细胞器,是细胞的能量工厂,在细胞的凋亡中也起着非常重要的作用。线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)是唯一的核外遗传物质,含有2个rRNA基因、22种tRNA基因及线粒体氧化磷酸化所需的13种多肽基因,参与细胞氧化磷酸化和能量代谢,与细胞的存亡息息相关。本研究拟观察姜黄素与顺铂联合对肺癌细胞增殖的抑制作用,并深入研究mtDNA基因、核凋亡相关基因表达变化与两药联合杀伤效应之间的相关性,目的在于寻找到有效的化疗增敏剂,为提高肺癌的临床疗效、减少顺铂的用量、减轻化疗的毒副反应提供实验依据。方法采用MTT法观察姜黄素、顺铂及两者联合对A549细胞的抑制作用,姜黄素单药设6个浓度组,分别为5、10、15、20、40、80μmol/L,顺铂设5个浓度组,分别为0.25、0.5、l、2、4μg/ml。两药联合取顺铂的终浓度为1μg/ml、2μg/ml分别与姜黄素5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L联合,同时设阴性对照组、空白对照组,培养24h、48h、72h后,观察对A549细胞增殖的影响;以流式细胞技术结合PI及AnnexinV-FITC双标染色观察细胞的凋亡情况;倒置显微镜、透射电镜观察细胞形态学的变化;提取未加药、两药联合作用6h、12h、18h、24h后A549细胞总RNA,逆转录荧光标记,用人mtDNA基因表达谱芯片检测靶基因的差异表达,GenPix Pro芯片图像分析软件进行基因差异的统计学分析。结果1.姜黄素、顺铂两单药对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用姜黄素、顺铂这两种单药均能抑制A549细胞的增殖,随着时间的延长,浓度的