猪miR-483-3p调控脂肪沉积相关基因研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kanoabin
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MicroRNAs (miRNAs)是一类长约22nt的内源性非编码小分子RNA,能通过与基因mRNA 3’非编码区结合而抑制靶基因mRNA及蛋白水平的表达。miR-483-3p是从人胎肝组织中分离的一高表达miRNA,位于IGF2内含子内,肿瘤细胞中miR-483-3p能通过靶向BBC3/PUMA基因协同IGF2促进细胞增殖并保护细胞免于凋亡,但miR-483-3p在组织生长发育调控中的作用研究很少,本研究旨在探索猪miR-483-3p调控脂肪沉积相关基因中的作用。取得的主要成果如下:1、通过对猪miR-483-3p和IGF2基因表达谱分析发现,猪miR-483-3p和IGF2基因表达趋势一致,说明猪niR-483-3p和IGF2可能受到共调控,基因功能相关。2、通过对猪miR-483-3p初级转录本SNP寻找与性状关联分析发现,该SNP位点与多个免疫和脂肪沉积相关性状显著关联,说明猪miR-483-3p在免疫和脂肪沉积中都有一定的作用,同时暗示猪miR-483-3p功能多样性。3、为了探索miR-483-3p在生长发育中的调控机制,通过靶基因预测软件HOCTAR预测:niR-483-3p靶基因筛选出PPARBP和CTNNB1两个与与脂肪分化密切相关的基因,验证发现,miR-483-3p能特异性结合到PPARBP和CTNNB1基因3UTR区域,并且3T3L 1细胞中过表达miR-483-3p, CTNNB1基因mRNA和蛋白质水平都呈现明显的下调趋势,但PPARBP基因仅mRNA水平下调,蛋白水平的变化不明显。4、在瘦肉精饲喂恩施黑猪4种组织中检测miR-483-3p、IGF2基因、CTNNB1基因和IGFBP3基因的mRNA相对表达水平发现,肝脏和肌肉组织中IGF2基因的表达量并未发生变化,但miR-483-3p和CTNNB1基因的表达上调;心脏和脂肪组织中,miR-483-3p、IGF2和CTNNB1基因的表达均上调,并且肌肉组织中IGFBP3基因有明显下调趋势。总之,miR-483-3p能够直接靶向脂肪沉积相关基因CTNNB1,并且在调控过程中miR-483-3p存在依赖和非依赖IGF2两种表达调控机制。
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