众所周知，无论是真核生物还是原核生物作外援蛋白表达载体，外援蛋白的高效表达时都容易形成没有活性的包涵体。目前，常用的提高外援蛋白可溶性表达的方法多属于基因工程方法，或者说是内因方法。本文的创新处是较系统的通过环境刺激(外因)的方法，包括温度突变，pH突变，渗透压突变，连续pH突变等，来提高重组抗人卵巢癌×抗人CD3双特异单链抗体在大肠杆菌载体中的可溶性表达，实验结果达126.6 mgAhOC×AhCD3/g DCW，大约是对照样的4倍。作为蛋白活性对照，本文也研究常规复性方法对目标蛋白复性的效果，结果表明在加入大量促复性剂的情况下，高倍数的稀释复性和低浓度的透析复性可以达到复性的目的，蛋白复性回收率分别达44.9％，35.6％。ELISA结果表明可溶性表达的和复性的目标蛋白都具有生物活性。