随着组织培养技术在植物中的应用日益广泛,将其用于生产植物次生代谢产物的研究也越来越深入。本研究以珍稀濒危中药材金铁锁(Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu)为试验材料,研究不同培养条件对金铁锁愈伤组织诱导增殖和次生代谢产物色素积累的影响,并对金铁锁色素进行初步分离鉴定。一方面为该珍稀种质资源的保护和充分利用提供新的思路,另一方面明确金铁锁愈伤组织细胞色素的主要成分,为实际生产中开发利用天然、安全的植物色素提供新的途径。主要结果与结论如下:1.采用植物组织培养技术,研究不同的消毒组合、不同的培养条件对金铁锁种子的萌发率及不同外植体(茎、叶及芽)对愈伤组织诱导增殖的影响。结果表明:将种子分别置于75%乙醇中75 s、0.1%高锰酸钾溶液中30 s及0.5%升汞中15 min消毒处理后进行萌发,得到的种子萌发率高,且污染率较其他处理低。芽诱导愈伤组织效果比茎及叶较好,且适宜的激素组合为0.2 mg·L-1 2,4-D和0.5 mg·L-1 6-BA,在此条件下诱导出的白色愈伤组织生长良好,可为进一步诱导积累色素提供充分的实验材料。2.通过比较不同培养条件下金铁锁愈伤组织生物量及色素产量的不同,筛选出利于愈伤组织增殖且色素合成的培养条件,结果表明:在基本培养基MS中同时添加1.5mg·L-1 NAA和0.5 mg·L-1 6-BA时色素产量较高,优于单独添加NAA和6-BA的情况。此外,2,4-D处理对色素的积累有着明显的抑制作用,IBA对色素的诱导无明显影响,采用1.5 mg·L-1的IAA也可诱导少量色素;MS和White培养基较其他培养基相比色素诱导积累效果更好,其适宜的培养条件为25℃、2000 lx和p H 5.8。3.通过对金铁锁愈伤组织诱导产生的色素进行初步提取鉴定和稳定性分析。在不同的色素提取及分离条件下,其提取分离效果有所不同,结果表明:在30℃时使用2%盐酸-甲醇溶液(溶剂料液比为1:10(g:m L))提取20 h,此条件下的色素提取效果较好。通过纸层析初步鉴定色素成分,层析可分离出2条色带,采用HPLC法进一步鉴定出矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为色素主要成分。对色素稳定性进行分析,可知在温度为4~60℃、偏酸及防腐剂存在的条件下色素较稳定;此外,金属离子Cu2+﹑Fe3+和光照等条件均对色素的稳定性有明显的破坏作用,所以金铁锁色素生产加工时应在遮光、少铜和少铁条件下进行。