目的：　　 椎间盘退变是引起腰痛的常见原因之一,其主要特征包括椎间盘内细胞数量减少和功能降低,以及蛋白多糖和Ⅱ型胶原等细胞外基质成分减少,而后者是椎间盘力学特性丧失的直接原因。细胞外基质变性主要是由于基质的合成和分解代谢失衡,其中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinases-1,TIMP-1)起着极为重要的作用。有效的调控MMPs及TIMP-1有助于维持椎间盘细胞外基质稳态,延缓和预防椎间盘退变。　　 大麻素具有广泛的药理活性,其中人工合成大麻素WIN55,212-2已被证实具有抑制炎性因子,减少蛋白多糖及胶原的降解,保护软骨的作用。然而WIN55,212-2在椎间盘细胞中的作用尚无研究。因此,本实验探索了WIN55,212-2对椎间盘软骨终板细胞表达基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1的影响,为延缓和治疗椎间盘退变寻求新的治疗靶点。　　 方法：　　 1、大鼠尾椎软骨终板细胞的分离与培养　　 采用两步酶消化法分离培养大鼠尾椎椎间盘软骨终板细胞,进行体外培养扩增。　　 2、MTT法测定大麻素对软骨终板细胞活力的影响　　 软骨终板细胞经不同浓度的IL-1α(1,2.5,5,10ng/ml),WIN55,212-2(1,5,10,20umol/l),IL-1α(10ng/ml)+WIN55,212-2(1,5,10,20umol/1),AM251(10umol/l),AM630(10umol/l)培养液刺激后,MTT法检测大麻素对软骨终板细胞活力的影响。　　 3、real-timeRT-PCR法测定大麻素对软骨终板细胞表达MMPs及TIMP-1的影响　　 软骨终板细胞经不同浓度的IL-1α(10ng/ml)+WIN55,212-2(1,5,10,20umol/l)刺激,在大麻素受体研究中,在加入IL-1α(10ng/ml)+WIN55,212-2(10mol/l)前2h分别用AM251(10umol/l)或AM630(10umol/l)预处理。提取总RNA后,real-timeRT-PCR法测定大麻素对软骨终板细胞表达MMP-1,3,13及TIMP-1的影响。　　 结果：　　 1、WIN55,212-2对软骨终板细胞的活力的影响　　 WIN55,212-2在实验条件下对软骨终板细胞无直接的毒性作用。　　 2、WIN55,212-2对软骨终板细胞表达MMPs和TIMP-1的影响　　 WIN55,212-2能抑制IL-1α引起的软骨终板细胞MMP-1,MMP-3和MMP-13的过度表达,增加TIMP-1/MMP-3比值,呈浓度依赖性。　　 3、选择性大麻素受体拮抗剂抑制WIN55,212-2对MMPs的调节　　 应用选择性大麻素受体拮抗剂AM251及AM630预处理软骨终板细胞,削弱了WIN55,212-2对MMPs的调节作用。　　 结论：　　 WIN55,212-2在体外抑制软骨终板细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13的表达,促进TIMP-1和MMP-3的平衡,大麻素受体CB1和CB2参与该调控过程。WIN55,212-2对延缓椎间盘退变具有潜在的应用价值。