纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)是纤溶系统的重要因子,以其作为靶点研发的溶栓药物在国内外一直是抗血栓新药物研究的热点。目前开发的PAI-1药用前体都存在着半衰期短,安全剂量范围窄,价格昂贵等缺点。本文从中草药入手,筛选下调内源性PAI-1表达的天然药用植物,有望避免以上不足,成为研制新型抗血栓药物的有效途径。通过建立实时荧光定量RT-PCR方法,检测人微血管内皮细胞PAI-1mRNA的表达。采用SYBR Green I定量PCR,建立标准曲线。方法学考核参数为特异性、线性范围、精密度和重复性。定量方法特异性好,检测的灵敏度达103拷贝,线性范围为103～1010拷贝,循环阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(R2 >0.990),批内变异1.56%～4.79%,批间变异8.54%～10.23%。通过对药用植物库的初步筛选和重复筛选,得到了能够下调PAI-1表达的中药川芎和丹参。其中川芎可将PAI-1 mRNA表达下调至空白对照的1.11倍。采用不同的溶剂提取川芎,培养人微血管内皮细胞,ELISA法测定细胞培养上清中组织纤溶酶原激活物(t-PA)和PAI-1的抗原含量,CSA法测定细胞培养上清中t-PA和PAI-1的活性,实时荧光定量RT-PCR法测定细胞培养上清中t-PA和PAI-1的mRNA表达。结果,川芎醇提物可明显提高t-PA的抗原含量。