磷脂酶A1催化水解大豆油制备甘油二酯的研究

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甘油二酯(Diacylglycerol,DAG)简称甘二酯,是由甘油与两个脂肪酸酯化后得到的产物,主要有两种异构体:1,3-甘油二酯与1,2-甘油二酯。甘油二酯是天然植物油脂的微量成分及体内脂肪代谢的内源中间产物,2000年获得美国FDA食品安全审查,通过了GRAS认证即“Generally Recognize As Safe”,是公认安全的食品成分。近年来发现,膳食DAG具有减少内脏脂肪、抑制体重增加、降低血脂等作用,因而受到广大学者的关注。以大豆油为原料,经磷脂酶A1催化水解甘油三酯,生成甘油二酯与脂肪酸。研究了水解时间、水解温度、加酶量和加水量对酶解反应的影响。通过正交实验得出磷脂酶A1水解大豆油的最佳反应条件为:水解温度35℃、加酶量26 u/g、加水量40%,水解时间8h。在此条件下,水解酸值达58.07mgKOH/g。大豆油经磷脂酶A1催化水解生成甘油二酯与脂肪酸。在不同的温度下,用分子蒸馏除去粗甘油二酯中的脂肪酸。结果表明:在135℃,真空度1Pa,刮膜速率250r/min下进行两次分子蒸馏,可以得到酸值为0.77 mgKOH/g,碘值为138.20 gI2/100g的甘油二酯产品。分子蒸馏得到的轻相和原料大豆油相比,碘值下降饱和度提高。分子蒸馏得到的产品,通过HPLC-UV法和HPLC-RID法测定了原料大豆油和分子蒸馏甘油二酯产品的甘油酯组成和含量。分析结果表明:HPLC-RID法是一种准确、快速测定甘油二酯含量的方法,磷脂酶A1催化水解通过分子蒸馏后得到产品中甘油二酯含量为42.64%。通过GC测定了原料大豆油和分子蒸馏轻相的脂肪酸组成和含量,分析结果表明:和原料大豆油相比,分子蒸馏得到的轻相脂肪酸中棕榈酸含量显著提高,而不饱和脂肪酸含量减少。经大豆油制备的甘油二酯产品,不饱和脂肪酸双键含量较多,容易受到周围环境因素的影响而被氧化。试验中以TBHQ和抗坏血酸棕榈酸酯为抗氧化剂,使用Rancimat法,在空气流量为10L/h、温度为110℃时,研究了50ppm,100ppm,150ppm和200ppm等不同剂量的抗氧化剂的条件下甘油二酯产品的诱导时间。结果表明:抗氧化剂TBHQ的最适浓度为100ppm,甘油二酯产品的诱导时间为9.62h。
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