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目的：通过比较两种不同成分脱钙液对肿瘤细胞抗原及分子诊断标志物检测的影响，探讨理想的骨活检组织脱钙方法，为骨转移癌的精确诊断和个体化治疗提供可靠依据。
方法：收集乳腺癌、非小细胞肺癌和结直肠癌肿瘤组织并模拟骨活检组织，分别用盐酸和乙二胺四乙酸(EDTA)对其进行脱钙处理；用免疫组织化学、荧光原位杂交、聚合酶链式反应等方法评估两种脱钙液对抗原表达、核酸质量及基因突变检测的影响。回顾性收集71例非小细胞肺癌骨转移灶穿刺标本，其中18例包含配对肺原发灶标本。收集患者临床、病理信息并检测肺原发灶及脱钙后骨转移灶的基因突变状态。
结果：与未脱钙组相比，盐酸和EDTA脱钙组肿瘤组织抗原免疫表达强度普遍下降，且盐酸脱钙后下降更为明显。其中以非小细胞肺癌细胞膜C-MET免疫表达强度变化最为明显，盐酸脱钙1小时和2小时后肺癌C-MET的表达强度分别下降77.5%(P=0.041)和82.5%(P=0.038)；EDTA脱钙2小时和4小时后分别下降22.5%(P=0.180)和57.5%(P=0.039)。乳腺癌及结直肠癌组织抗原免疫表达强度在盐酸脱钙2小时后下降最为明显(26.6%-41.4%)，而EDTA脱钙4小时后稍下降(5%-34.8%)。荧光原位杂交方法检测乳腺癌HER-2基因扩增发现盐酸脱钙2小时后肿瘤细胞内HER-2/CEP17信号比下降了57.4%，EDTA脱钙4小时后该比值下降33.5%。盐酸脱钙后，肿瘤组织DNA片段化明显，DNA浓度也显著下降，但EDTA脱钙后DNA片段大小、浓度变化较小。此外，在非小细胞肺癌和结直肠癌靶向基因突变检测中，54.5%盐酸脱钙病例判读为假阴性，仅1例(9%)EDTA脱钙病例判读假阴性。18例晚期非小细胞肺癌肺原发灶及骨转移灶配对样本基因突变结果显示：EGFR突变状态一致率为61.1%，剩余7例(38.9%)患者原发灶和转移灶基因突变状态不一致。
结论：与盐酸相比，EDTA脱钙液能更好的保存肿瘤细胞抗原免疫性和核酸质量。处理骨活检标本时，建议优先采用EDTA脱钙液；同时诊断脱钙骨活检标本时应考虑脱钙液对肿瘤细胞生物标志物的影响，谨慎判读。
方法：收集乳腺癌、非小细胞肺癌和结直肠癌肿瘤组织并模拟骨活检组织，分别用盐酸和乙二胺四乙酸(EDTA)对其进行脱钙处理；用免疫组织化学、荧光原位杂交、聚合酶链式反应等方法评估两种脱钙液对抗原表达、核酸质量及基因突变检测的影响。回顾性收集71例非小细胞肺癌骨转移灶穿刺标本，其中18例包含配对肺原发灶标本。收集患者临床、病理信息并检测肺原发灶及脱钙后骨转移灶的基因突变状态。
结果：与未脱钙组相比，盐酸和EDTA脱钙组肿瘤组织抗原免疫表达强度普遍下降，且盐酸脱钙后下降更为明显。其中以非小细胞肺癌细胞膜C-MET免疫表达强度变化最为明显，盐酸脱钙1小时和2小时后肺癌C-MET的表达强度分别下降77.5%(P=0.041)和82.5%(P=0.038)；EDTA脱钙2小时和4小时后分别下降22.5%(P=0.180)和57.5%(P=0.039)。乳腺癌及结直肠癌组织抗原免疫表达强度在盐酸脱钙2小时后下降最为明显(26.6%-41.4%)，而EDTA脱钙4小时后稍下降(5%-34.8%)。荧光原位杂交方法检测乳腺癌HER-2基因扩增发现盐酸脱钙2小时后肿瘤细胞内HER-2/CEP17信号比下降了57.4%，EDTA脱钙4小时后该比值下降33.5%。盐酸脱钙后，肿瘤组织DNA片段化明显，DNA浓度也显著下降，但EDTA脱钙后DNA片段大小、浓度变化较小。此外，在非小细胞肺癌和结直肠癌靶向基因突变检测中，54.5%盐酸脱钙病例判读为假阴性，仅1例(9%)EDTA脱钙病例判读假阴性。18例晚期非小细胞肺癌肺原发灶及骨转移灶配对样本基因突变结果显示：EGFR突变状态一致率为61.1%，剩余7例(38.9%)患者原发灶和转移灶基因突变状态不一致。
结论：与盐酸相比，EDTA脱钙液能更好的保存肿瘤细胞抗原免疫性和核酸质量。处理骨活检标本时，建议优先采用EDTA脱钙液；同时诊断脱钙骨活检标本时应考虑脱钙液对肿瘤细胞生物标志物的影响，谨慎判读。