补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠PI3K、AKT1及MTOR蛋白表达的影响

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目的:通过体内实验建立免疫性卵巢早衰小鼠模型,探讨补肾活血方对卵巢早衰小鼠PI3K、AKT1及MTOR蛋白表达的影响。方法:SPF级Balb/c雌性小鼠,用透明带3作抗原,对小鼠进行皮下多点分散注射,建立免疫性卵巢早衰动物模型。模型制备成功后,将造模后的小鼠随机分为模型组、阳性药物组、补肾活血方高、中、低浓度组。连续给药30天。采用苏木精-伊红(HE)染色法,于光镜下观察卵巢组织的病理形态学变化。酶联免疫吸附法检测雌二醇(E2)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)的水平表达。免疫组织化学法检测卵巢组织内PI3K、AKT1及MTOR蛋白的表达,并进行统计学分析。结果:(1)通过对小鼠体质量的统计分析,发现与空白组相比,模型组小鼠的体质量明显降低(P<0.01)。而且通过对阴道脱落细胞涂片HE染色镜下观察,发现模型组小鼠的动情周期紊乱,提示造模成功。之后通过用酶联免疫吸附法检测激素水平,其结果也为造模成功提供了佐证。(2)与空白组相比,模型组小鼠E2的水平降低,FSH和LH的水平升高(P<0.01);与模型组相比,中药组和阳性组E2的水平均有所上升,FSH和LH的水平也有所下降,以中药高浓度组的效果最佳(P<0.01)。(3)与空白组相比,模型组小鼠的卵巢指数、胸腺指数明显下降(P<0.01),脾脏指数明显升高(P<0.01)。与模型组相比,阳性组与中药高浓度组小鼠的卵巢指数和胸腺指数明显上升(P<0.01),脾脏指数出现下降(P<0.01)。中药中浓度组与低浓度组小鼠的卵巢指数及胸腺指数没有统计学差异(P>0.05),脾脏指数有统计学意义(P<0.05)。(4)与空白组相比,模型组小鼠卵巢组织的PI3K、AKT1、MTOR蛋白表达明显下降(P<0.01)。与模型组相比,中药各浓度组与阳性组成熟卵泡数量均有明显增多,闭锁卵泡数量相对减少,中药高浓度组与阳性组PI3K、AKT1、MTOR蛋白的表达明显增高(P<0.01)。结论:补肾活血方可能通过影响PI3K、AKT1及MTOR蛋白的表达,改善POF小鼠的卵巢功能,促进卵泡的生长、发育,提高E2的表达水平,降低FSH和LH的表达水平,维持卵巢内环境的稳定。
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