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糖尿病是一种内分泌代谢性疾病,其诱因是由于胰岛素分泌不足,进而导致血糖过高,最终引起蛋白质和脂肪的代谢发生紊乱。目前,糖尿病严重威胁着人类的健康,2016年的世界卫生组织调查显示,目前我国成年人的糖尿病发病率已经接近10%,形势十分严峻。普遍研究表明,胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)是导致2型糖尿病的主要原因,在胰岛素抵抗个体中,正常量的胰岛素不能使脂肪、骨骼肌和肝脏从血液中摄取葡萄糖,血糖持续升高,使胰岛代偿性分泌更多的胰岛素以维持血糖的稳定,而胰岛β细胞不能代偿高血糖将导致代谢综合征和2型糖尿病。本课题主要针对GBP5和HULC是否参与炎症因子诱导的胰岛素抵抗进行研究。GBP5属于鸟苷酸结合蛋白GBPs家族的一种,可以被细菌脂多糖(LPS)高诱导。另外,GBP5还能够促进哺乳动物NLRP3炎症小体的组装和免疫。而HULC属于lncRNA的一种,目前对于lncRNA的新兴的研究涉及到发育,分化,生长组织损伤、修复、再生,及代谢的广泛的生物过程。新的疾病相关lncRNA基因也正在发现当中,并且其分子机制正在被一步一步发现和阐明。但是,GBP5和HULC的表达调控是否受炎症因子调控还不清楚,并且,GBP5和HULC是否调节肝脏胰岛素抵抗也还不清楚。为此,本课题针对炎症因子是否影响GBP5和HULC的表达水平,以及GBP5和HULC是否调节肝脏炎症诱导的胰岛素抵抗进行了探究。研究结果如下:第一部分:通过普通PCR验证和Realtime PCR验证,发现炎症因子(TNF-α、IFN-γ混合物)处理Hepa1细胞后,可以促进GBP5高表达,且炎症因子处理组比对照组GBP5表达水平高2200倍左右。根据以上实验结果,采用TNF-α和IFN-γ单独处理肝脏细胞,发现在Hepa1细胞中,TNF-α处理组GBP5的表达升高了1.7倍左右,IFN-γ处理组GBP5表达升高了700倍左右;而在肝实质细胞中,TNF-α处理组GBP5的表达升高了5倍以上。此实验证明炎症因子可以促进GBP5的高表达。那么GBP5是否参与了炎症诱导的胰岛素抵抗呢?为了探究这个问题,本课题构建了GBP5过表达腺病毒,在原代肝实质细胞中过表达后,检测胰岛素诱导的Akt磷酸化水平,进而判断GBP5是否参与炎症诱导的胰岛素抵抗。结果发现过表达GBP5后,Akt蛋白表达水平降低,Akt蛋白磷酸化水平降低,证明过表达GBP5可以参与炎症诱导的胰岛素抵抗。第二部分:通过普通PCR验证和Realtime PCR验证,发现炎症因子TNF-α处理HepG2细胞后,可以促进HULC高表达,且炎症因子处理组比无血清处理组的HULC表达水平高2.5倍左右。为了进一步探究HULC是否参与了炎症诱导的胰岛素抵抗,本课题构建了HULC过表达腺病毒,在HepG2细胞中过表达后,检测胰岛素诱导的Akt磷酸化水平,结果发现过表达HULC后,Akt蛋白表达水平没有变化,Akt蛋白磷酸化水平也没有变化,证明HULC没有参与炎症诱导的胰岛素抵抗。