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目的研究探讨Poly I:C复合物在体外抑制人A549细胞株的细胞增殖作用,进一步探讨Poly I:C复合物是否通过上调TLR3表达,抑制细胞周期、诱导细胞凋亡抑制A549细胞的增殖。方法:1.①选择CCK-8细胞活力实验检测经过10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL浓度的Poly I:C复合物分别对A549细胞处理24小时、48小时后细胞活力,明确Poly I:C复合物是否在体外抑制人A549细胞株的活力并影响其增殖。进而明确Poly I:C复合物对A549细胞抑制作用的最佳时间与浓度(仅限于本实验所应用时间与浓度);为后续实验提供依据。②选择单层细胞增殖实验检测100 u g/ml Poly I:C复合物分别对A549细胞处理24小时、48小时后细胞的增殖倍数;明确Poly I:C复合物是否在体外抑制人A549细胞株的细胞增殖,并进一步明确Poly I:C复合物对A549细胞抑制作用的最佳浓度(仅限于本实验所应用浓度),为后续实验提供依据。2.选择RT-QPCR法检测100u g/ml Poly I:C复合物干预A549细胞48小时后TLR3 m RNA的表达情况,并与对照组比较,从而明确Poly I:C复合物是否上调TLR3表达。3.①选择Annexin V-FITC法流式细胞术测得100u g/ml Poly I:C复合物对A549细胞48小时处理后的细胞凋亡的比例,与对照组比较,从而明确Poly I:C复合物是否明显诱导细胞凋亡;②选择Annexin PI法流式细胞术检测100u g/ml Poly I:C复合物对A549细胞处理48小时后受抑制的细胞周期,从而明确Poly I:C复合物是否抑制细胞周期。结果:1.①当分别给予浓度为 10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL的Poly I:C复合物干预A549细胞24小时及48小时后,观察结果发现均可抑制A549细胞活力,PolyI:C复合物的最佳浓度为100μg/mL,最佳时间为48h(仅限于本实验所应用时间与浓度)。②用100 μ g/ml Poly I:C复合物处理A549细胞24h时,与对照组比较,细胞增殖率从92%降为61%。48h时与对照组比较,细胞增殖率从55%降为37%(P<0.05)。24小时后单层细胞增殖倍数较对照组减少1.49倍(p>0.05),48小时后减少2.07倍(P<0.01)。2.正常情况下A549细胞表达TLR3 mRNA,当给予浓度为100u g/ml的Poly I:C复合物刺激48小时后,TLR3mRNA水平升高至1.52,对照组TLR3 mRNA水平为1.24。(**P<0.01)。3.①Poly I:C复合物处理A549细胞48h时测得A549细胞晚期凋亡率为(20.14±0.85)%,高于对照组(0.13±0.06)%(P<0.001)。②Poly I:C 复合物干预A549细胞48h时阻滞A549细胞的G1期,100 μg/ml Poly I:C复合物组G1期细胞总比例为(55.16±0.97)%,而对照组为(46.52±0.58)%(***P<0.001)。结论:1.Poly I:C复合物在体外抑制A549细胞的细胞增殖。2.Poly I:C复合物在体外上调A549细胞TLR3的表达影响其增殖。3.Poly I:C复合物在体外通过抑制A549细胞G1期,促进A549细胞凋亡,从而抑制细胞增殖。