N蛋白是良好的应用于病毒感染早期诊断的抗原,该研究拟选择此蛋白为靶点,通过基因克隆、蛋白表达、纯化和鉴定,得到具有免疫学活性的纯化重组N蛋白,为TRIFA诊断SARS试验和SARS基因工程疫苗的研制提供物质基础.结论:利用RT-PCR技术成功的扩增了SARS冠状病毒N蛋白全长基因,测序结果显示插入片段阅读框正确,与其他SARS冠状病毒毒株同源性为99.92％;构建了原核表达质粒pET23d/N,以非融合蛋白的形式高效表达了SARS冠状病毒N蛋白,低温诱导时重组蛋白以可溶性表达为主;优化了重组蛋白的表达条件,并成功的纯化此蛋白;经Western blot分析,重组蛋白具有良好的抗原性,应用于TRIFA检测SARS抗原的试验中取得初步结果,为SARS的早期诊断奠定了基础.