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背景:儿童单纯性肥胖已呈逐年增加的趋势。肥胖症是心血管疾病、高血压、2型糖尿病、慢性炎症和胆石症等疾病的重要危险因素,严重威胁人类健康。研究发现肥胖者体内瘦素的水平与胰岛素水平明显高于正常人,说明肥胖者存在瘦素抵抗(leptin resistance)和胰岛素抵抗(insulin resistance)[1]。胰岛素抵抗是指一定浓度的胰岛素没有达到预期的生理效应,表现为外周组织尤其是肌肉、脂肪组织对葡萄糖的摄取减少和抑制肝脏葡萄糖输出减少。胰岛素与瘦素(leptin)具有同一信号转导通路,即Janus激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(signal transduction activating transcription factor,STAT)通路。细胞因子信号转导抑制因子3(suppressors of cytokine signaling 3,SOCS-3)是JAK/STAT通路的主要负性调节因子。SOCS-3可参与多种细胞因子的信号转导。大量基础性研究结果表明肥胖动物模型存在血清胰岛素水平升高,胰岛素受体(insulin receptor,InsR)表达下降和SOCS-3基因表达上调。因而SOCS-3表达上调可能参与了胰岛素抵抗的形成。RNA干扰( RNA interference,RNAi)作为抑制基因表达的新技术,目前已广泛用于哺乳动物的基因功能和疾病治疗研究[2]。因此,通过RNAi下调SOCS-3基因表达有可能使InsR表达升高,可能对肥胖症的胰岛素抵抗有治疗作用。目的:模拟儿童,以生后5周(相当于幼年期)的SD大鼠为实验动物。通过RNA干扰技术建立SOCS-3表达下调模型,然后予以高脂饲料喂养,通过观察大鼠体重变化,检测下丘脑InsR mRNA表达水平,探讨RNA干扰(RNAi)引起的下丘脑SOCS-3表达下调对InsR mRNA的影响,从而对肥胖症的胰岛素抵抗是否有治疗作用。方法:(本实验前期已提取下丘脑RNA,并采用放射免疫法测定了胰岛素和C肽含量以及应用全自动生化分析仪检测了血糖含量)样品分为2组:(1)RNAi+高脂饮食组(RNAi+high-fat diet,RNAi+HFD)(n=10),即下丘脑注射SOCS-3 lenti,高脂饲料喂养(含20%猪油);(2)control lenti +高脂饮食组(control lenti + high-fat diet ,Con+HFD)(n=8),即下丘脑注射control lenti,高脂饲料喂养(含20%猪油);分别采用半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR)(以β-actin为内对照)和荧光定量PCR (fluorescent quantitative PCR)法(以GAPDH为内对照)检测两组大鼠下丘脑内InsR mRNA表达。结果:1. RNAi+HFD组大鼠体重降低较Con+HFD组明显,8周末时两组间差别具有极显著性意义(p<0.01)。2.RNAi+HFD组大鼠血清胰岛素、血糖、C肽浓度均低于Con+HFD组,两组间差别均有统计学意义(p<0.05)。3.半定量RT-PCR法检测结果:RNAi+HFD组大鼠下丘脑InsR mRNA表达(相对灰度值)明显高于Con+HFD组,两组间差别有统计学意义(p<0.01)。4.荧光定量PCR法检测结果:RNAi+HFD组大鼠下丘脑InsR mRNA表达高于Con+HFD组,两组间差别有统计学意义(p<0.05)。结论:1.下调SOCS-3基因表达,可降低血清胰岛素、血糖和C肽浓度,提示SOCS-3基因表达下调能有效改善糖代谢紊乱和胰岛素抵抗。2.下调SOCS-3基因表达,使InsR mRNA表达升高,提示SOCS-3基因表达下调对肥胖症的胰岛素抵抗可能有治疗作用。